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别名 Dispase I
Neutral protease I (Dispase I) 是一种快速且温和的中性蛋白酶,能够有效地分离表皮层与真皮层,以及培养物中的上皮细胞层与下层。其在保持上皮细胞活力的同时,对基底膜区域进行消化。此外,Neutral protease I 可防止悬浮培养物中的细胞聚集。它能够水解纤连蛋白和IV型胶原蛋白,但不作用于层粘连蛋白、V型胶原蛋白、血清白蛋白或转铁蛋白。
Neutral protease I (Dispase I) 是一种快速且温和的中性蛋白酶,能够有效地分离表皮层与真皮层,以及培养物中的上皮细胞层与下层。其在保持上皮细胞活力的同时,对基底膜区域进行消化。此外,Neutral protease I 可防止悬浮培养物中的细胞聚集。它能够水解纤连蛋白和IV型胶原蛋白,但不作用于层粘连蛋白、V型胶原蛋白、血清白蛋白或转铁蛋白。
| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10 mg | 待询 | 待询 | |
| 50 mg | 待询 | 待询 |
| 产品描述 | Neutral protease I (Dispase I) is a rapid, effective, and mild neutral protease used to separate the epidermal layer from the dermal layer. It can also separate intact epithelial cell layers from cultures without affecting the vitality of epithelial cells, even while digesting the basement membrane area. Additionally, Neutral protease I prevents cell clumping in suspension cultures and can hydrolyze fibronectin and type IV collagen, but it does not hydrolyze laminin, type V collagen, serum albumin, or transferrin. |
| 体外活性 | 使用方法(仅供参考) 1. 溶液配制:使用无钙镁离子的DPBS缓冲盐溶液溶解适量冻干粉,制备成10 mg/mL的储存液,经过0.22 μM滤膜过滤消毒。在使用时,将此储存液用DPBS稀释至工作浓度,通常用于细胞分离的工作浓度为0.6-2.4 U/mL。注:建议避免使用超过2.4 U/mL的浓度。2. 组织的解离:将组织切成3-4 mm的小块,用无菌PBS清洗。加入Dispase II溶液(浓度为0.6-2.4 U/mL),确保组织完全浸没在溶液中,37℃下孵育并轻柔搅拌,直至组织完全解离。对于难解离的组织,通常1小时即可达到分离效果,延长孵育时间不会显著影响细胞活性。如有需要,可通过无菌不锈钢网筛过滤消化产物,以分开单细胞和剩余组织块,或在大块组织沉淀后轻轻倒出上层细胞。如有必要,换用新鲜的dispase溶液以进一步解离剩余组织。离心沉淀细胞,弃去酶溶液;用培养基重悬细胞沉淀,并在常规条件下培养。3. 细胞传代:用预热至37℃的Dispase溶液处理细胞,37℃孵育5分钟;移除溶液,再于37℃孵育10分钟;在显微镜下检查细胞分离情况,如必要,继续孵育15分钟;用培养基悬浮细胞,轻轻旋转,沉淀后的细胞用培养基清洗;最终换用新鲜培养液重悬细胞,并按常规方法铺板。 |
| 别名 | Dispase I |
| 存储 | Powder: -20°C for 3 years | In solvent: -80°C for 1 year |
对于不同动物的给药剂量换算,您也可以参考 更多