Hydroxyphenyl Fluorescein (HPF) is a cell-permeable fluorescent dye for the detection of highly reactive oxygen species with little or no intrinsic fluorescence.Hydroxyphenyl Fluorescein can be used in fluorescent enzyme labeling and flow cytometry, and can be used to Neurodegeneration and aging. Fluorescence wavelength: Ex/Em = 490/515 nm.

操作步骤：
a.储备液的制备:用 DMSO 配制 10 mM 的 HPF；（建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存）
b.HPF 工作液的制备
稀释储备液在无血清细胞培养基或 PBS 中溶解，配制成 1-10 μM 的 HPF 工作液；（根据实验需求选择合适的工作液浓度，现配现用）
c.细胞染色
1. 悬浮细胞 （6 孔板）
a．在 4℃ 下以 1000 g 离心 3-5 分钟，然后弃去上清液。PBS 洗涤 2 次，每次 5 分钟。细胞密度为 1×106/mL；
b．加入 1 mL 工作液，室温孵育 15 分钟；
c． 4℃、400 g 离心 3-4 分钟，弃上清；
d．用 PBS 洗涤 2 次，每次 5 分钟；
e．用无血清细胞培养基或 PBS 重悬细胞。荧光显微镜或流式细胞仪观察。
2. 贴壁细胞
a．在无菌盖玻片上培养贴壁细胞；
b.从培养基上取下盖玻片并吸出多余的培养基；
c.加入 100 μL 工作液，轻摇使之完全覆盖细胞，室温孵育 15 分钟；
d．用培养基洗涤 2 次，每次 5 分钟。荧光显微镜或流式细胞仪观察。