DAB tetrahydrochloride dihydrate 作为染料经氧化后转变为不溶性聚合物，在反应区域形成深棕色沉淀，从而使目标分子显色。在免疫组化中，DAB tetrahydrochloride dihydrate 作为过氧化物酶的底物偶联到一抗或二抗。在组织化学染色方法中，使用 DAB tetrahydrochloride dihydrate 可以对细胞器中的过氧化物酶体和线粒体细胞色素 c 氧化酶 (COX) 进行活性染色[1]。
细胞色素 c 氧化酶 (COX) 组织化学染色 protocol[1]（该方案仅供参考，您可根据具体实验需求进行调整）:

1. 在 37°C 下使用 约50µL COX 染色液 (0.1 M NaPO4, 4 mM DAB tetrahydrochloride dihydrate, 100 µM cytochrome c, 2 mg/mL catalase) 孵育切片 45 分钟。
2. 使用PBS清洗3次，每次5分钟，然后依次用75%和95%乙醇各处理1分钟，最后用100%乙醇处理10分钟进行脱水。
3. 染色完成后，样品需完全干燥后方可取样。