JC-10 is a potent inhibitor of metalloproteinases and is often used as a probe.

准备1X JC-10工作溶液：在汉克斯和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）中准备10至30 μM的1X工作溶液。用测试化合物处理细胞以诱导凋亡。对于空白孔，添加相应量的化合物缓冲液。向细胞板的每个96孔板孔添加100 μL或每个384孔板孔添加25 μL JC-10工作溶液。将板在37 ℃、5% CO2培养箱中孵育15-60分钟。在Ex/Em = 490/525 nm（FITC通道）和540/590 nm（TRITC通道）监测荧光变化进行比率分析。

使用方法
一溶液配置
1.母液配置：将JC-10染料溶解于无水DMSO中，制备成100×储备液。
2.工作液制备：使用预热的细胞培养基将储备液稀释至工作浓度。例如，将10 µL JC-10储备液加入1 mL预热的培养基中，混匀，直至溶液从粉红色变为近无色。
二、操作步骤
细胞染色
1.将染料工作液加入细胞中，确保细胞完全浸没。
2.在37°C避光孵育15-30分钟。
3.洗涤：孵育后，去除染料工作液。
4.用预热的PBS或培养基洗涤细胞2-3次，去除未结合的染料。
5.检测：使用荧光显微镜或流式细胞仪进行检测。
JC-10在健康细胞的线粒体中形成聚集体，显示橙红色荧光（激发/发射波长：540/590 nm）；在膜电位下降时，JC-10以单体形式存在，显示绿色荧光（激发/发射波长：490/525 nm）。
注意事项：
1）操作时需戴手套，避免皮肤或粘膜与试剂接触。
2）孵育和储存过程中应避免光照，以防荧光淬灭。
3）染色完成后，应尽快进行荧光检测分析。