EF-5结合与前药的代谢还原在14种低氧肿瘤细胞系的一组中高度相关。CYPOR的过表达在SiHa和HCT116细胞系中造成了EF-5结合与tirapazamine及CEN-209的代谢还原相似的2到4倍增加，这与γH2AX形成的增强相似。[1]

EF-5结合是对于苯并三唑-N-氧化物生物还原前药的一个有前途的分层生物标记物。使用单克隆抗体在9L胶质瘤中的结合与检测是特异性的且依赖于氧气。肿瘤缺氧的修改导致对两种试剂的生物还原激活产生类似变化，从而在个体肿瘤水平上EF-5结合和CEN209引起的DNA损伤之间存在强烈的相关性[1]。使用荧光显微镜可以在冷冻组织上进行结合的检测；组织切片可以用苏木精和伊红进行对照染色，以供光学显微長分析。通过使用流式细胞术检查个别肿瘤细胞，可以推断肿瘤中缺氧的分布[2]。