7-Ethoxyresorufin (Resorufin ethyl ether) (7-ER) is a fluorometric substrate for and competitive inhibitor of cytochrome P450, especially CYP1A1.

使用方法
一、溶液配置
1.母液配置： 7-Ethoxyresorufin溶于 DMSO 或乙醇，配置成 1–10 mM（根据实验需要调整）。
2.工作浓度： 通常为 0.5–5 µM。（根据实验需要调整）
注意事项：
1）粉末： 在 -20°C 下避光干燥保存。
2）储备液： 在 -20°C 下避光存储，短期可在 4°C 存储，避免反复冻融。
二、 CYP1A1/CYP1A2 酶活性检测
操作步骤
1. 样本准备：
使用肝微粒体或培养的细胞作为样本。细胞需要预处理以诱导 CYP1A1 或 CYP1A2 的表达（如用苯并[a]芘或 3-甲基胆蒽处理）。
2.反应体系：
1）配制反应缓冲液（如 50 mM Tris-HCl，pH 7.4）。
2）将 7-Ethoxyresorufin 的储备液稀释至工作浓度（如 2 µM），并加入至缓冲液中。
3）加入 NADPH 生成系统（如 NADPH 或 NADPH 再生系统），以启动反应。
3.反应条件：
1）在 37°C 下孵育 10–30 分钟（具体时间根据实验优化）。
2）停止反应：可通过加入等体积的冷乙醇或甲醇终止反应。
3.荧光检测：
反应生成的 Resorufin（去乙氧基产物）发出强绿色荧光：
激发波长： ~530 nm
发射波长： ~585 nm
使用荧光分光光度计或微孔板读数仪测量荧光信号。