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Collagenase Type II(胶原酶II)是一种从Clostridium histolyticum细菌中提取的内肽性基质金属蛋白酶MMP-8,优先降解I型胶原蛋白,常用于胰脏、肝脏等消化效率要求高的组织。
Collagenase Type II(胶原酶II)是一种从Clostridium histolyticum细菌中提取的内肽性基质金属蛋白酶MMP-8,优先降解I型胶原蛋白,常用于胰脏、肝脏等消化效率要求高的组织。
规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
---|---|---|---|
25 mg | ¥ 249 | 现货 | |
50 mg | ¥ 390 | 现货 | |
100 mg | ¥ 639 | 现货 |
产品描述 | Collagenase Type II, an endopeptidic matrix metalloproteinase MMP-8 derived from the bacterium Clostridium histolyticum, preferentially degrades type I collagen and is commonly used in tissues requiring high digestive efficiency such as pancreas and liver. |
体外活性 | Collagenase Type II通常用于从心脏、骨骼、肝脏、胸腺、唾液腺和软骨中制备原代细胞[1]。 使用说明 (1)溶解:将II型胶原酶在Hank's平衡盐溶液(HBSS)中溶解至1mg/mL的浓度,然后使用0.2μm滤器进行无菌过滤。常用浓度为0.5-2.5mg/mL(用于组织和细胞分散),1-2mg/mL(用于软骨消化),具体浓度可根据实验条件或文献建议进行调整。 (2)处理组织或细胞层:将小块组织或细胞层用胶原酶溶液覆盖,并在37°C下孵育。将组织切成3-4mm大小的块,用含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS溶液洗涤。将胶原酶溶液添加至组织块,确保其完全浸没,保持37°C孵育4-18小时(时间依据组织类型而有所不同)。可以使用水平摇床,并可添加3mM的CaCl₂以提高消化效率。 (3)检查细胞分离情况:使用显微镜观察细胞是否成功分离。 (4)离心和洗涤:细胞分离后应立即进行离心,并使用缓冲液洗涤两次,以去除残留的胶原酶,因为新鲜培养基无法停止酶的活性。 (5)重悬和培养:将细胞重悬于新鲜培养基中,并继续培养。 |
体内活性 | 以白兔为实验对象,在膝关节实验中,右膝注射Collagenase Type II(4 mg/mL,250 μL),并于3天后重复注射,左膝则注射生理盐水作为对照。结果显示,右膝出现水肿和厚度增加,8天后软骨表面粗糙且退化加重,I型和II型胶原蛋白表达异常。血液中仅在第8和16天时观察到中性粒细胞短暂增加,无系统性炎症反应,表明该方法仅引起局部软骨退化。该诱导的骨关节炎模型能够模拟人类骨关节炎(OA)的病理过程,且不会引发类风湿性关节炎的系统性炎症[2]。在角膜实验中,右眼(实验组)用Collagenase Type II(200 μL,5 mg/mL)处理30分钟,左眼(对照组)则用不含胶原酶的溶液进行处理。结果显示,术后实验组未出现明显炎症反应,与对照组相比,实验组的平均角膜曲率显著增加,中央角膜厚度显著降低。特定畸形下,实验组的平均应力和弹性模量也显著降低,表明Collagenase Type II可以有效模拟圆锥角膜[3]。 |
别名 | 胶原酶 II |
存储 | keep away from moisture,store at low temperature | Powder: -20°C for 3 years | In solvent: -80°C for 1 year |
溶解度信息 | H2O: 50 mg/mL, Sonication is recommended. |
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