PE 154 is a potent fluorescent inhibitor of acetylcholinesterase (AChE) and butyrylcholinesterase (BChE) with IC50s of 280 pM and 16 nM respectively. PE 154 is commonly used to label β-amyloid plaques in histochemical analysis.

AChE:280 pM, BChE:16 nM

使用方法
一、试剂准备
母液和工作液的配置：通常浓度为 1 mM 的储备溶液可以通过稀释得到所需的工作浓度（例如 0.1–10 μM），具体浓度根据实验要求和目标组织的特点进行调整。
二、 标记组织和样品
1.组织准备：在使用 PE 154 进行组织染色时，首先需要准备组织切片。对于小鼠或其他动物模型，通常选择经过适当固定（如使用甲醛固定）的脑组织。
2. 染色过程：
1）将组织切片或细胞样本置于含有 PE 154 溶液的染色液中。染色溶液的浓度通常在 1 μM 到 10 μM 之间，根据实验需求调整。
2）样品应在室温下孵育 30 分钟到 1 小时。孵育时间取决于样品的类型和实验的具体要求。
3. 洗涤：
孵育后，用 PBS 或适当的缓冲液轻轻洗涤切片，去除未结合的染料，以减少背景信号。
三、 荧光成像
1.PE 154 是一种荧光标记剂，因此可以通过荧光显微镜、共聚焦显微镜等设备进行成像。
2.其激发波长通常为 470 nm，发射波长为 520 nm。
3.染色后的样品在显微镜下可观察到清晰的荧光信号，特别是当β-淀粉样蛋白斑块被标记时，斑块区域会显示出强烈的荧光。
四、数据分析
1.对于β-淀粉样蛋白斑块的分析，可以通过荧光显微镜直接观察样品的荧光强度，定量分析斑块的数量、大小和分布。
2.对于 AChE 和 BChE 的活性分析，可以通过与已知浓度的 PE 154 标准品进行比较，分析酶的抑制效应。
注意事项：
1.溶解性：PE 154 在溶解时需确保溶剂不影响实验的结果。使用 DMSO 时要特别小心，避免高浓度溶剂对细胞或组织的毒性。
2.光敏性：PE 154 是一种光敏化合物，因此在存储和操作时应避免强光照射，以防止荧光信号的光漂白。
3.样品处理：在进行组织切片或细胞标记时，确保样品处理过程中的固定、切片和染色步骤都保持一致性，以确保结果的可靠性。
4.背景信号：若实验中出现高背景信号，可能是由于未完全洗涤染料造成的。需要确保染料完全结合到目标分子或组织上，并且未结合的染料充分清洗干净。