1-Methyl-7-nitroisatoic anhydride (1M7) is a reagent. It detects local nucleotide flexibility, for probing 2'-hydroxyl reactivity.

1-Methyl-7-nitroisatoic anhydride RNA 的形状和结构处理实验
a.溶液和样品的制备：
1.溶液配制：
1.1 母液配置：配置成一定浓度的1M7 母液，分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。
1.2 工作液配置：根据实验需求选择合适的工作液浓度，如将其稀释成浓度为 80 mM 的 1M7 工作液，尽量现配现用。
2.样品 RNA 的制备：
RNA 应溶于不含 RNase 的水或 0.5× TE 缓冲液 pH 8.0 中，浓度为 5 μM，并在 −20 °C 下分装储存。
b.操作步骤：
1. 1 μL 80 mM 1M7 + 9 μL RNA，通过移液快速混合并在 37 °C 下孵育 3 分钟。1M7 试剂孵育时间取决于所研究系统的温度和 pH 值。在较低温度和酸性 pH 值较高的情况下，孵育时间会更长。
2.乙醇沉淀。混合液中加入 90 μL 不含 RNase 的水、4 μL 5 M NaCl、1 μL 糖原 （20 mg/mL）、240 μL 乙醇。搅拌均匀。在 −80℃ 下孵育 30 分钟。
3. 4℃ 下用微量离心机以最大速度离心 30 分钟，再进行后续引物扩展实验。