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常见问题解答
问细胞实验中，抑制剂如何溶解？
答用 DMSO 配置较高浓度母液，母液存于 -80℃，建议多分装几管，一周内使用的存于 4℃，避免反复冻融。实验时用 pbs、生理盐水、培养基、水这些稀释，细胞实验DMSO的终浓度不超过 0.1%。如果超过 0.1%，则需要在做预试验的时候，先进行溶剂阴性对照实验，排除溶剂对细胞的影响。
问如何稀释工作液？
答根据您的工作液浓度，计算母液所需要稀释的倍数和所需母液的体积。建议用水、生理盐水、PBS等溶剂进行稀释，如果是细胞实验，可以使用培养基。
取适当的溶剂缓慢加入到母液中，直到达到您的工作液浓度，可以通过涡旋或者移液枪轻轻吹打帮助混匀。
我们的化合物大部分是脂溶性的，所以在使用 PBS 或者培养基等稀释工作液的时候，会有沉淀析出，这些都是正常现象，大多时候可以通过超声完全溶解。
工作液建议现配现用！
问细胞实验中需要加多少抑制剂？
答通常建议您参考同模型实验发表的文献报道；除参考文献报道以外，还需要通过预实验做“剂量-效应曲线”确定最佳作用浓度（浓度梯度）；通过“时间-效应曲线”确定最佳孵育时间（处理时间梯度）。另外，抑制剂的使用量受多种因素影响，包括抑制对象的可接触性、细胞通透性、孵育时间、细胞种类等等。我们建议通过检索文献确定使用抑制剂的起始浓度。
如果有报道的 Ki 值或 IC50 值，可以采用其 5-10 倍的量开始尝试以达到抑制酶活性的最佳效果。
如果抑制剂的 Ki 值或 IC50 值未知，则需要在更广泛的范围尝试抑制剂的使用浓度，并采用 Michaelis-Menten 动力学计算 Ki 值。
一般设立溶解抑制剂时所采用的溶剂作为对照，以排除溶剂的非特异性影响。
问超声一般需要多久？
答超声时长和溶解的量和浓度都有关，一般建议半个小时左右，如果浓度接近最大溶解度，或者需溶解的粉末较多，建议延长超声时间，并辅以加热。
问抑制剂是否需要灭菌？
答如果您使用 DMSO 配制：不建议灭菌，DMSO 本身具有极强的杀菌力，配制好的溶液就是无菌溶液。如果您确实担心的，可以放置 4℃ 冰箱过夜放置即可；依然有顾虑的话，需用有机系专用滤膜过滤。
如果您使用水配制：可以用 0.22 μm 滤膜过滤灭菌。
