PLK1-IN-12 (Compound B31) 在多种细胞系中表现出抗增殖作用：(0.508 nM-10 μM，24 小时) 在 H460 (IC 50: 12 nM)、A549 (IC 50: 32 nM)、SW620 (IC 50: 8.2 nM)、HL-60 (IC 50: 59 nM)、K562 (IC 50: 0.08 nM) 和 CCRF-CEM (IC 50: 41 nM)。在肝微粒体中，PLK1-IN-12 (1 μM，5 分钟) 显示出快速清除率 (Cl int: 68.3-210 μL/min/mg protein)。对 HEK293T 细胞的细胞活力抑制作用较低 (68%)，反映出相对安全性 (0.1-30 μM，24 小时)。对 hERG 钾通道抑制作用有限 (IC 50: 44.2 μM)，暗示心脏毒性风险低 (0.4-100 μM)。此外，PLK1-IN-12 (10 μM，5-30 分钟) 对 CYP1A2、CYP3A4、CYP2D6、CYP2B6、CYP2C8 无抑制作用，对 CYP2C9 和 CYP2C19 的抑制也仅为轻微，显示在人和大鼠肝细胞中均具有良好的稳定性，药物相互作用的风险较低。

PLK1-IN-12 (Compound B31) 在小鼠皮下 K562 细胞移植肿瘤模型中，以灌胃方式每周两次给予 10/20 mg/kg，可有效抑制肿瘤生长。此外，每天一次以 500 mg/kg 剂量灌胃 7 天，未观察到对小鼠各器官的组织损伤或毒性。