Dansyl amide is a fluorescent dye used in biochemistry and chemistry to label substances with the fluorescent dansyl group.

使用方法
一、试剂准备
1.储备液的配置：将其溶解在适当的溶剂中，如二甲基亚砜（DMSO）或乙醇。
2.工作液的配置：Dansylamide 的典型工作浓度范围为10 µM至1 mM，具体浓度可根据实验要求调整。
二、操作步骤
1.标记过程：
1） 样品准备： 准备待标记的样品，如蛋白质、肽或其他生物分子。对于蛋白质标记，通常需要使用足量的纯化蛋白。
2）反应： 将样品与Dansylamide溶液混合，并加入适当的缓冲液。缓冲液的 pH 值应通常控制在8.0左右，以优化标记过程。
3） 孵育： 在室温下孵育样品，反应时间通常为30分钟至2小时，具体时间可以根据目标分子和所需标记程度调整。
4）终止反应： 孵育后，可以通过加入适当的终止剂或稀释样品来停止反应。
2.纯化：标记反应完成后，可使用透析、凝胶过滤等方法去除未反应的Dansylamide，以纯化标记的生物分子。
3.荧光检测：
1）检测： 可以使用荧光分光光度计或荧光显微镜进行检测。激发波长设定为335 nm，发射波长设定为510 nm。荧光强度与标记的生物分子量成正比。
2）数据分析： 根据荧光强度的变化，可以绘制标准曲线，并通过对样品和对照组的比较来评估标记程度。
注意事项：
1.光稳定性： Dansylamide 对光敏感，实验中应避免长时间的强光照射，以防止荧光衰减。
2.浓度控制： 标记浓度过高可能导致自荧光淬灭，因此应优化染料浓度以避免这种情况。
3.兼容性： 在使用与其他荧光染料或标记试剂时，需确保不同染料的发射光谱没有重叠，以避免信号干扰。