C12FDG (5-Dodecanoylaminofluorescein di-beta-D-Galactopyranoside) is used as a lipophilic green fluorescent substrate for detecting beta-galactose activity, a green fluorescent substrate, is a senescence marker and is often used in conjunction with flow cytometry.

荧光老化相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)实验 [1]:
1. 培养细胞，密度为105个/mL .
2. 用200 μL PBS洗涤细胞1次，然后用100 μL固定液(2%甲醛/0.2%戊二醛蒸馏水)在室温下固定5分钟。
3. 用200 μL PBS洗涤细胞2次，用100 μL 33 μM C12FDG (PBS,pH=6.0)染色10 min，再用200 μL Hoechst溶液(1 μg/mL Hoechst 33342)在PBS(pH 6.0)上染色10 min。
4. 用20倍物镜和360 nm (Hoechst 33342)和480 nm (C12FDG)的激发滤光片对细胞成像，用460 nm和535 nm的发射滤光片对细胞进行监测。
仅供参考，应根据您的实验具体需要进行修改。

荧光老化相关 β-半乳糖苷酶 （SA-β-Gal） 实验
一、溶液配制：
1.母液配置：配置成一定浓度的 C12FDG 母液，分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。
2.工作液配置：根据实验需求选择合适的工作液浓度，尽量现配现用。
二、操作步骤：
1.培养细胞，密度为 105个/mL
2.用 200 μL PBS 洗涤细胞 1 次，然后用 100 μL 固定液（2% 甲醛/0.2% 戊二醛蒸馏水）在室温下固定 5 分钟。
3.用 200 μL PBS 洗涤细胞 2 次，用 100 μL 33 μM 的C12FDG （PBS，pH = 6.0）染色 10 min，再用 200 μL Hoechst 溶液（1 μg/mL Hoechst 33342）在 PBS（pH 6.0） 上染色 10 min。
d.用 20 倍物镜和 360 nm （Hoechst 33342） 和 480 nm （C12FDG） 的激发滤光片对细胞成像，用 460 nm 和 535 nm 的发射滤光片对细胞进行监测。