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常见问题解答
问细胞实验中，抑制剂如何溶解？
答用 DMSO 配置较高浓度母液，母液存于 -80℃，建议多分装几管，一周内使用的存于 4℃，避免反复冻融。实验时用 pbs、生理盐水、培养基、水这些稀释，细胞实验DMSO的终浓度不超过 0.1%。如果超过 0.1%，则需要在做预试验的时候，先进行溶剂阴性对照实验，排除溶剂对细胞的影响。
问细胞实验中需要加多少抑制剂？
答通常建议您参考同模型实验发表的文献报道；除参考文献报道以外，还需要通过预实验做“剂量-效应曲线”确定最佳作用浓度（浓度梯度）；通过“时间-效应曲线”确定最佳孵育时间（处理时间梯度）。另外，抑制剂的使用量受多种因素影响，包括抑制对象的可接触性、细胞通透性、孵育时间、细胞种类等等。我们建议通过检索文献确定使用抑制剂的起始浓度。
如果有报道的 Ki 值或 IC50 值，可以采用其 5-10 倍的量开始尝试以达到抑制酶活性的最佳效果。
如果抑制剂的 Ki 值或 IC50 值未知，则需要在更广泛的范围尝试抑制剂的使用浓度，并采用 Michaelis-Menten 动力学计算 Ki 值。
一般设立溶解抑制剂时所采用的溶剂作为对照，以排除溶剂的非特异性影响。
问得到的杀死细胞的 IC50 与网页上 IC50 差距较大怎么办？
答您所测试的IC50是指细胞的增殖抑制实验（半抑制率），细胞增殖抑制实验 IC50值，和网页上的靶点IC50其实是不同的意义。文献里和网页上 IC50其实往往是指对于靶点无细胞实验的抑制率，这样的实验一般是通过激酶或者蛋白纯化实验做出来的，nM 级别的浓度比较常见，但是细胞的增殖抑制实验 IC50 是指细胞的半致死率，同时牵涉到细胞的代谢以及渗透，一般浓度会高一些。
另外，同一个化合物对不同细胞模型的效果也是不同的，建议尝试增加孵育量、延长孵育时间。
问Tween-20 可以用 Tween-80 替代吗？
答不建议使用 Tween-20。相较于 Tween-20，Tween-80 的耐受性更好，Tween-80已被用作评估实验药物和毒物的行为影响的工具，且没有明显的副作用。
参考文献：Castro CA， Hogan JB， Benson KA， Shehata CW， Landauer MR. Behavioral effects of vehicles: DMSO， ethanol， Tween-20， Tween-80， and emulphor-620. Pharmacol Biochem Behav. 1995 Apr;50(4):521-6.
问溶解度中写的“< 1 mg/mL refers to the slightly soluble or insoluble ”是什么意思？
答这句话指的是，如果溶解度 < 1 mg/mL，那我们就认为它是微溶或不溶的，这是针对写的“DMSO：Insoluble”或“DMSO：slightly soluble”这类化合物的。
