Thiazolyl Blue (MTT) is a colorimetric compound widely used in measuring cell proliferation. It is reduced from yellow color to purple formazan in living cells.

使用方法
一、试剂准备：首先将 MTT 溶解在适当的溶剂中（通常是 PBS 或生理盐水），通常浓度为 0.5 mg/mL 到 5 mg/mL，具体浓度根据实验需要调整。通过过滤或离心去除不溶物，以确保溶液纯净。
二、操作步骤
1.细胞处理：在 96 孔板或其他适当的培养板中接种细胞，培养至合适的密度（例如 1 × 10⁴ 到 1 × 10⁶ 细胞/孔）。
细胞培养完成后，加入一定体积的 MTT 溶液（通常为 10 µL 到 50 µL），确保每个孔内的最终浓度为 0.5 mg/mL 到 1 mg/mL。
2.将细胞与 MTT 一起孵育，孵育时间通常为 2 到 4 小时，具体时间可以根据实验要求进行调整。
3. 反应处理：孵育结束后，去除培养基，加入适量的溶剂（如 DMSO 或异丙醇）以溶解形成的紫色甲臜晶体。常见溶剂是 DMSO，通常加入 100 µL 到 200 µL 的 DMSO。轻轻摇晃板子，确保溶解完全。
4. 比色测定：使用酶标仪在 570 nm（或 590 nm）波长下测量每孔的吸光度（OD 值）。紫色的甲臜产物与细胞的存活数量成正比，因此，吸光度值越高表示细胞活性越强。通过计算与空白孔的吸光度差值来获得每个样本的吸光度。
5. 数据分析：
1）根据吸光度数据，可以计算细胞的增殖率或存活率。
2）常通过对照组与处理组之间的 OD 值进行比较，计算药物或化学试剂对细胞的影响。
3）可以用标准曲线方法，来进一步定量细胞存活率。
注意事项
1.细胞密度：细胞的接种密度应当适当。如果细胞过密，可能导致反应过度而影响实验结果；如果细胞密度过低，则可能无法产生足够的信号。
2.溶解度：在使用 DMSO 或其他溶剂时，应确保溶剂不会对细胞产生毒性。
3.时间控制：孵育时间过长或过短可能会影响 MTT 还原反应，因此需要根据细胞类型和实验目的优化时间。

以上信息均来源于已发表文献，具体实验方案请根据实际研究需求进行适当调整。

DMSO: 50 mg/mL (120.68 mM), Sonication is recommended.

H2O: 0.88 mg/mL (2.12 mM), Sonication and heating are recommended.

10% DMSO+40% PEG300+5% Tween-80+45% Saline: 2.5 mg/mL (6.03 mM), Sonication is recommended.