Rhodamine 800 is a near-infrared fluorescent dye.

Rhodamine 800的荧光强度随溶剂的不同而有显著变化，在溶剂从2-propanone变更至水时，荧光强度会减少至原来的五分之一以下，而发射峰位置并无显著变化。

使用方法
一、试剂准备
1.储备溶液配置：将其溶解在适当的溶剂中，如二甲基亚砜（DMSO）或乙醇，制备储备溶液。储备溶液的浓度通常为 0.1 mM 至 1 mM，具体浓度根据实验需求而定。
2.工作液配置：在体外或体内应用时，通常将储备溶液用 PBS（磷酸盐缓冲液）或其他适合的缓冲液稀释至所需的工作浓度，通常工作浓度范围为 1 µM 到 100 µM，具体浓度根据实验设计调整。
二、操作步骤
1.样品准备：
1）细胞标记：可以用 Rhodamine 800 标记细胞、组织或蛋白质。如果是标记细胞，染料应与细胞一起孵育一段时间（通常为 30 分钟到 1 小时），然后洗涤去除多余的染料。
2）体内成像：在体内成像实验中，可以将 Rhodamine 800 静脉注射或局部涂抹，染料会聚集在特定的组织或器官中，使用近红外成像系统进行荧光检测。
2. 标记和成像：
1）细胞培养：将细胞与 Rhodamine 800 溶液一起孵育，时间通常为 30-60 分钟，然后用 PBS 洗涤细胞，去除未结合的染料。之后可使用近红外荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。
2）组织与体内成像：对于组织或体内应用，可以使用近红外荧光成像系统（如 IVIS Lumina，PerkinElmer）来检测 Rhodamine 800 的荧光。在这些设备上，荧光发射波长通常在 780-800 nm 范围内。
3.数据采集与分析：
1）光谱检测：Rhodamine 800 的荧光通常在 800 nm 附近（发射波长）被检测，激发波长一般在 750-760 nm 之间。
2）定量分析：荧光强度可以与染料浓度或标记的细胞、组织或蛋白质的数量相关联。使用成像系统专用的软件对图像数据进行分析，以量化信号强度。
注意事项：
1.溶解性：Rhodamine 800 在有机溶剂（如 DMSO）中溶解良好，但在水中的溶解度较差，因此需要使用适当的溶剂和缓冲液。
2.自发荧光：Rhodamine 800 的荧光发射位于近红外区域，有助于减少生物样本中自发荧光的干扰。
3.稳定性：该染料在标准实验条件下相对稳定，但对光敏感，因此应避免在处理和存储过程中直接暴露于强光下，以防止荧光漂白。