Reactive Blue 4 is an anthraquinone dye with phytotoxic, cytotoxic, and genotoxic. It is a single colorimetric chemosensor for the sequential determination of multiple analytes with different optical responses in aqueous media.

使用方法
一、溶液制备
1.储备液： 将 Reactive Blue 4 溶解于去离子水或适当的溶剂（如乙醇、PBS）中，制备浓度为 1–10 mM 的储备液。
2.工作液： 将储备液根据实验要求稀释至工作浓度，通常为 0.1–1 mM。稀释时可使用去离子水或缓冲溶液。
二、 操作步骤
1. 水质分析： 由于 Reactive Blue 4 在不同光学响应下能与多种分析物反应，通常用于水质的检测。将工作液加入样本中并通过比色法（可使用分光光度计）测量吸光度。
2.细胞或生物组织染色： 用适当的浓度染料（通常为 1–10 µM）孵育细胞或组织，并在规定时间内进行染色。染色后可用显微镜或流式细胞仪分析细胞中的反应信号。
3.表面活性物质测定： 在水溶液中使用该染料作为传感器监测水中表面活性物质的浓度。通过染料的吸光度变化，可以推断污染物的浓度。
4.荧光检测：激发与发射波长： Reactive Blue 4 在 UV 或可见光波段下可被激发，常用的激发波长为 480–500 nm，发射波长大约为 590 nm。使用分光光度计或荧光显微镜观察染色后的样本。
5. 校准与对照：
1）对照组： 设立不加染料的对照组以确保实验的特异性。
2）标准曲线： 可通过已知浓度的分析物样本建立标准曲线，来定量分析反应的敏感性与特异性。
注意事项：
1.毒性： Reactive Blue 4 具有植物毒性、细胞毒性和基因毒性，因此在使用时应采取适当的安全措施，如佩戴防护手套和眼镜，并在通风良好的环境下操作。
2.光敏性： 该染料对光敏感，应避免长时间暴露在强光下。
3.储存条件： 应存放在阴凉干燥处，温度不超过 4°C，并避免反复冻融。
4.溶解性： 该染料在水中的溶解性良好，但应确保溶液中无颗粒。