一、溶液配制
1.母液配制：将MitoPerOx 使用DMSO溶液配置成（1-10mM）母液，保存时请置于-20℃~-80℃，避光分装，避免反复冻融。
2.工作液配置：用 PBS 或纯的DMEM将母液稀释至 100 nM-1 µM待用，请根据您的实验要求对母液进行稀释。
二、MitoPerOx 检测实验步骤
1.将细胞（如 HEK293细胞 ）接种于 35 mm 培养皿的盖玻片上，于 37 °C、5% CO2 条件的培养箱中进行培养。
2.向培养基中加入 100 nM MitoPerOx，避光 37 °C 孵育 30 min。
3.弃去培养基，用 PBS 洗涤细胞 3 次。
4.在 Hepes-Tris 缓冲液中加入 500 μM H2O2，处理细胞时间约为 15-30 min。
5.使用共聚焦显微镜 (激发波长 488 nm) 采集 520 nm (氧化态) 和 590 nm (还原态) 的发射光，通过计算 520/590 nm 比率量化脂质过氧化程度。