DiBAC4(3) is a voltage-sensitive fluorescent dye (λem=505 nm, λex=490 nm).

使用方法
一、溶液制备
1.储备液：DiBAC4(3) 可以溶解在 DMSO 或其他适当的溶剂中，制备浓度为 1-10 mM 的储备液。
2.工作液：根据实验需要，将储备液稀释至工作浓度，通常为 1–5 µM，使用适当的缓冲液或培养基（例如 PBS 或 RPMI）。
二、操作步骤
1. 细胞染色：将细胞接种到合适的培养皿中，培养至所需的密度。将 DiBAC4(3) 工作液加入到含细胞的培养基中。
2.在 37°C 下孵育 15–30 分钟。孵育时间可能根据实验条件有所不同。孵育过程中应避免光照，以防染料降解。
3.洗涤：孵育后，用新鲜的培养基或 PBS 洗涤细胞，去除未结合的染料。
4. 此时细胞可用于荧光检测。
5. 荧光检测：激发与发射波长：DiBAC4(3) 可通过 490 nm 波长的光激发，发射波长大约为 505 nm。
荧光强度与膜电位的变化相关。荧光强度增加通常与超极化相关，而荧光强度降低则与去极化相关。
显微镜/流式细胞仪：对于荧光显微镜，使用配有适当滤光片的显微镜来观察发射波长 505 nm 的荧光；对于流式细胞仪，可以在 505 nm 范围内测量荧光，分析单个细胞膜电位的变化。
6. 应用领域：
1）膜电位研究：DiBAC4(3) 被广泛用于监测活细胞膜电位的变化，这对于离子通道活性、药物筛选和细胞可兴奋性研究至关重要。
2）心脏与神经研究：它常用于心脏细胞、神经元及其他可兴奋细胞的电生理学研究。
3）毒理学与细胞应激：DiBAC4(3) 还可用于评估毒性因子对细胞膜电位的影响。
注意事项：
1.光敏性：DiBAC4(3) 对光敏感，样本应在暗处或弱光环境中处理。
2.毒性：尽管在工作浓度下通常是安全的，但高浓度可能会影响细胞活力。因此，建议为每种细胞类型优化浓度。

以上信息均来源于已发表文献，具体实验方案请根据实际研究需求进行适当调整。

DMSO: 55 mg/mL (106.46 mM), Sonication is recommended.