Sucrose Synthetase Assay Kit (Spectrophotometry)

Name: Sucrose Synthetase Assay Kit (Spectrophotometry)
Brand: TargetMol
SKU: CB0170S
Rating: 5 (4 reviews)

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产品编号 CB0170S

别名 蔗糖合成酶（SS）活性检测试剂盒（分光光度法）

蔗糖是源（叶片等）光合产物向“库”器官运输的主要形态。蔗糖合成酶（Sucrose synthase，SS）（EC 2.4.1.13）催化植物体内游离果糖和葡萄糖合成蔗糖。

规格	价格	库存	数量
50 T	¥ 825	4-6日内发货

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实验操作小课堂

常见问题解答

检测原理

SS 催化游离果糖与葡萄糖供体 UDPG 反应生成蔗糖，蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变化，在 480nm 下有特征吸收峰，酶活力大小与颜色的深浅成正比。

产品规格

50T/24S规格的产品组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
CB0170S-ES	30mL×1 瓶	4℃保存；
CB0170S-A	4mL×1 瓶	-20℃保存；
CB0170S-B	粉剂×1 瓶	4℃保存；临用前加入1 mL水，配制成10mg/mL溶液，再将其用蒸馏水稀释为2000 μg/mL备用
CB0170S-C	3mL×1 瓶	4℃保存；
CB0170S-D	40mL×1 瓶	4℃保存；
CB0170S-E	10mL×1 瓶	4℃保存；

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

操作说明

一、自备用品：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

二、粗酶提取：
按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL CB0170S-ES），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 480nm，蒸馏水调零。
2.在EP管中依次加入下列试剂：

试剂名称	测定管（µL）	对照管（µL）	标准管（µL）	空白管（µL）
上清	30	30
蒸馏水		150	150	180
CB0170S-B			30
CB0170S-A	150
混匀，25℃准确水浴 10min
CB0170S-C	50	50	50	50
沸水浴中煮沸 10min 左右（盖紧，以防止水分散失），冷却
CB0170S-D	700	700	700	700
CB0170S-E	200	200	200	200
混匀，沸水浴 30min，冷却后，480nm 下测定各管吸光值。

注意：标准管和空白管只要做 1-2管。每个测定管需要设一个对照管。

四、SS 活力单位的计算：
(1)按照蛋白浓度计算
单位定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SS 活性 (U/mg prot) = {C 标准管×V1×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)} ÷(V1×Cpr)÷T=200×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr

(2)按照样本鲜重计算
单位定义：每 g 组织每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SS 活性 (U/g 鲜重) = {C 标准管×V1×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)} ÷(W×V1÷V2)÷T=200×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷W
注： C 标准管：标准管浓度，2000μg/mL；V1：加入反应体系中样本体积，0.03mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；T：反应时间：10min。