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Sucrose Synthetase Assay Kit (Microanalysis)

Sucrose Synthetase Assay Kit (Microanalysis)

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Sucrose Synthetase Assay Kit (Microanalysis)
产品编号 CB0170M
别名 蔗糖合成酶(SS)活性检测试剂盒(微量法)
蔗糖是源(叶片等)光合产物向“库”器官运输的主要形态。蔗糖合成酶(Sucrose synthase,SS)(EC 2.4.1.13)催化植物体内游离果糖和葡萄糖合成蔗糖。
规格价格库存数量
100 T
¥ 1,512
4-6日内发货
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

SS 催化游离果糖与葡萄糖供体 UDPG 反应生成蔗糖,蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变化,在 480nm 下有特征吸收峰,酶活力大小与颜色的深浅成正比。

Handling Instruction | TargetMol 产品规格

100T/48S规格的产品组成及保存条件:

编号 规格 储存条件
CB0170M-ES 100mL×1 瓶 4℃保存;
CB0170M-A 2.5mL×1 瓶 -20℃保存;
CB0170M-B 10mL×1 瓶 4℃保存;
CB0170M-C 2mL×1 瓶 4℃保存;
CB0170M-D 25mL×1 瓶 4℃保存;
CB0170M-E 6mL×1 瓶 4℃保存;

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰。

二、粗酶提取:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL CB0170M-ES),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

三、测定步骤:
1.分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 480nm,蒸馏水调零。
2.在EP管中依次加入下列试剂:

试剂名称 测定管(µL) 对照管(µL) 标准管(µL) 空白管(µL)
上清 10 10
蒸馏水 45 45 55
CB0170M-B 10
CB0170M-A 45
混匀,25℃准确水浴 10min
CB0170M-C 15 15 15 15
沸水浴中煮沸 10min 左右(盖紧,以防止水分散失),冷却
CB0170M-D 210 210 210 210
CB0170M-E 60 60 60 60
混匀,沸水浴 30min,冷却后,取 200μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中,480nm 下测定各管吸光值。
注意:标准管和空白管只要做一管。每个测定管需要设一个对照管。

四、SS 活力单位的计算:
(1)按照蛋白浓度计算
单位定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SS 活性 (μg /min/mg prot) = {C 标准管×V1×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)} ÷(V1×Cpr)÷T=100×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷Cpr

(2)按照样本鲜重计算
单位定义:每 g 组织每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SS 活性 (μg /min /g 鲜重) = {C 标准管×V1×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)} ÷(W×V1÷V2)÷T=100×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷W
注: C 标准管:标准管浓度,1000μg/mL;V1:加入反应体系中样本体积,0.01mL;V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g;T:反应时间:10min。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.蛋白定量测定,建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。