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| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 100 T | ¥ 473 | 4-6日内发货 |
蒽酮比色法。可用于可溶性单糖、寡糖和多糖的含量测定,具有灵敏度高、简便快捷、适用于微量样品的测定等优点。
100T/96S规格的产品组成及保存条件:
| 编号 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| CB0173M-A | 粉剂×1 瓶 | 4℃避光保存; |
| CB0173M-B | 5mL×1 瓶 | 4℃保存; |
| CB0173M-Standard | 粉剂×1 瓶 | 4℃保存 |
正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
一、自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、沸水浴、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、浓硫酸(不允许快递)研钵、和蒸馏水。
二、可溶性糖提取:
称取 0.1~0.2g 样本,加入 1mL 蒸馏水研磨成匀浆,倒入有盖离心管中,95℃水浴 10min(盖紧,以防止水分散失),冷却后,8000g,25℃离心 10min,取上清液于 10ml 试管中,用蒸馏水定容至 10mL,摇匀备用。
三、测定步骤:
1.分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 620nm,蒸馏水调零。
2.调节水浴锅至95℃。
3.标准品准备:临用前加入 1 mL 蒸馏水溶解,配制成 10 mg/mL 标准溶液备用(4℃可保存1周),然后再用蒸馏水稀释至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125 、0.00625、0 mg/mL。
4.工作液的配制:在CB0173M-A中加入2.5mL CB0173M-B,充分溶解后使用,如较难溶解,可加热搅拌;用不完的试剂 4℃保存一周;
5.在 EP 管中依次加入下列试剂:
| 试剂名称 | 空白管(μL) | 测定管(μL) | 标准管(μL) |
|---|---|---|---|
| 样本 | 40 | ||
| 标准液 | 40 | ||
| 蒸馏水 | 80 | 40 | 40 |
| 工作液 | 20 | 20 | 20 |
| 浓硫酸 | 200 | 200 | 200 |
| 混匀,置95度水浴中10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温后,取 200 μL转移至微量比色皿或 96 孔板中,于620nm 处,分别读取各管吸光值。 | |||
四、可溶性糖含量计算公式:
1.标准条件的建立:以浓度(y)为纵坐标,标准品吸光度(x)为横坐标建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA(ΔA=A测定管-A空白管)带入公式中计算样本浓度 y(mg/mL)。
2.按样本鲜重计算
可溶性糖 (mg /g 鲜重) = [(y×V1]÷(W×V1÷V2) =10×y÷W
3.按样本蛋白浓度计算
可溶性糖 (mg /mg prot) = (y×V1)÷(V1×Cpr)=y÷Cpr
注:V1:加入样本体积,0.04mL;V2:加入提取液体积,10mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。
1.如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可需要将样本用蒸馏水稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
3.由于浓硫酸具有强腐蚀性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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