Plant Flavonoids Assay Kit (Microanalysis)

在碱性亚硝酸盐溶液中，类黄酮与铝离子形成在 502nm 处有特征吸收峰的红色络合物，测定样品提取液在 502nm 处的吸光值，即可计算样品类黄酮含量。

100T/48S规格的产品组成及保存条件：

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴锅、可调式移液枪、研钵、冰和双蒸水、天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机。

二、类黄酮样品提取：
将样本烘干至恒重，粉碎，过 30-50 目筛之后，称取约 0.1g，加入 1mL 提取液，用超声提取法进行提取，超声功率 300W，破碎 5s，间歇 8s，60℃，提取 30min。10000g，25℃，离心 10min，取上清，用提取液定容至 1mL，待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计或酶标仪预热 30min，调节波长至 502nm，蒸馏水调零。
2.标准溶液的制备：临用前加入 1 mL 标准品缓冲液配制成 10 mg/mL 标准液，再将其用60%乙醇稀释至1、0.75、0.5、0.25、0.125、0.0625、0 mg/mL备用。
3.按列表中顺序加入上述试剂：

四、类黄酮含量计算公式:
1.标准曲线绘制：以标准品浓度为横坐标，ΔAˊ为纵坐标绘制标准曲线y=kx+b，将ΔA带入方程求得x (mg/mL)；
2.按样本质量计算：
类黄酮含量(mg/g 质量)=x×V提取÷W=x÷W
3.按样本蛋白浓度计算：
类黄酮含量(mg/mg prot)=x×V提取÷(Cpr×V提取) =x÷Cpr
V提取：加入提取液体积；1mL；W：样本质量，g；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL。

1.显色完成后立即测定，2 小时后吸光值会下降。
2.如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。