Neutral Xylanase Assay Kit (Spectrophotometry)

Name: Neutral Xylanase Assay Kit (Spectrophotometry)
Brand: TargetMol
SKU: CB0175S
Rating: 5 (4 reviews)

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产品编号 CB0175S

别名 中性木聚糖酶检测试剂盒（分光光度法）

木聚糖酶（Neutral xylanase, NEX）（EC 3.2.1.8）主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，NEX 一般分离自最适生长 pH 为 6-8 的微生物。

规格	价格	库存	数量
50 T	¥ 506	10-12日内发货

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实验操作小课堂

常见问题解答

检测原理

NEX 在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在 540nm 处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率，可计算 NEX 活力。

产品规格

50T/24S规格的产品组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
CB0175S-ES	65mL×1 瓶	4℃保存；
CB0175S-A	10mL×1 瓶	4℃避光保存；
CB0175S-B	15mL×1 瓶	4℃避光保存；

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

操作说明

一、自备用品：
天平、低温离心机、恒温水浴锅，可见分光光度计/酶标仪、1ml玻璃比色皿和蒸馏水。

二、粗酶液提取：
1.发酵液：发酵液于 8000g，4℃，离心 15min，取上清，作为待测样品。
2.酶干粉：称约 0.1mg，加缓冲液 1mL，震荡溶解待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 540nm。
2.CB0175S-B、CB0175S-C和CB0175M-D置于 30℃水浴保温 30min。
3.在0.5 mL EP 管中按顺序加入下列试剂：

试剂名称	对照管（μL）	测定管（μL）
样品	200	200
CB0175S-ES	300	300
CB0175S-A		200
CB0175S- B	300
混匀，盖紧瓶盖，50℃水浴，反应 30min，立即沸水浴 10min 灭活。（注意不要让盖子爆开，以免进水，改变了反应体系）
CB0175S-A	200
CB0175S- B		300
混匀，沸水浴显色 5min（注意不要让盖子爆开，以免进水改变了反应体系），取1mL 玻璃比色皿，对照管调零，测定 A540。

四、NEX活性计算公式：
标准曲线：y =1.6904x + 0.0058，R² = 0.9989
1.发酵液 NEX 活力计算
酶活定义：50℃，pH6.0 条件下，每毫升发酵液每分钟分解木聚糖产生 1nmol 还原糖所需的酶量为一个中性木聚糖酶的活力单位。
NEX 活力 (nmol/min/mL) = A540-0.0058÷(1.6904×150×30) ×5×1000= 657×(A540-0.0058)
式中：150：木糖的分子量，30：反应时间，5：稀释倍数 (1mL÷0.2mL=5)，1000：转化因子，即 1mmol/L=1000μ mol/L
2.酶干粉 NEX 活力计算
酶活定义：50℃，pH6.0 条件下，每毫克酶每分钟分解木聚糖产生 1nmol 还原糖所需的酶量为一个中性木聚糖酶的活力单位。
NEX 活力 (nmol/min/mg) = (A540-0.0058)÷(1.6904×150×30) ×5×1000÷W = 657×(A540-0.0058)÷W
注： 150：木糖的分子量；T：反应时间，30min；稀释倍数=V反总÷V样=300µL÷60µL=5；1000：转化因子，即 1mmol/L=1000μ mol/L；W：样本质量，mg。
式中：150：木糖的分子量，30：反应时间，5：稀释倍数(1mL÷0.2mL=5)，1000：转化因子，即 1mmol/L =1000μ mol/L；W：样本质量，mg。

注意事项

1.吸光度变化应该控制在 0.01~0.8 之间，否则加大样品量或稀释样品，注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变；也可以延长或者缩短反应时间。
2.试剂盒 2-8℃保存，保质期 3 个月，建议尽快使用。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。