GO Assay Kit (UV Spectrophotometry)

乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，乙醛酸和盐酸苯肼反应生成乙醛酸苯腙，在324nm有特征吸收峰。

50T/48S规格的产品组成及保存条件：

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
紫外分光光度计、1mL石英比色皿、天平、低温离心机。

二、酶液提取：
按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL CB0305UV-ES），进行冰浴匀浆。12000g， 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计预热30min，调节波长至324nm，蒸馏水调零。
2.取1mL石英比色皿中依次加入：

四、计算公式：
1.按照蛋白浓度计算
酶活性定义：每毫克蛋白每分钟氧化1nmol乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。
GO活性 (nmol/min /mg prot) = ΔA÷(ε×d)×V反总÷(V样×Cpr)÷T = 392×ΔA÷Cpr
2.按照样本质量计算
酶活性定义：每克组织每分钟氧化1 nmol乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。
GO活性 (nmol/min /g 鲜重) = ΔA÷(ε×d)×V反总÷(V样×W÷V样总)÷T = 392×ΔA÷W
注：ε：乙醛酸苯腙毫摩尔消光系数：17L/mmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，1mL；V样：反应中样本体积，0.05mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W，样本质量，g；T：反应时间，3min。

1.测定之前进行预实验，若吸光值较高，请将样品用提取液进行适当的稀释再测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。
2.色素含量较高的样品，可在提取酶时加活性炭吸附。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。