X-Neu5Ac被神经氨酸酶水解，释放出一个经快速好氧氧化形成深蓝色颜料的卤代产物。初步动力学研究表明，X-Neu5Ac是一种良好且稳定的神经氨酸酶底物。此外，X-Neu5Ac也能被突变酶水解。

为了在大鼠脑膜表面可视化细胞外神经酰胺酶活性，将急性脑切片在pH 7.3的条件下与X-NeuNAc孵育。孵育1小时后，富含髓鞘的区域在大鼠脑中显示出强烈的荧光。尽管海马区在大脑中显示出弱荧光，但海马区的苔藓纤维末梢显示出相对强烈的荧光。此外，由X-NeuNAc引起的荧光强度与神经酰胺酶活性相关。因此，使用X-NeuNAc进行染色特异性地针对神经酰胺酶，对于神经酰胺酶活性的定量分析十分有用[1]。