方法:采用生物素化 WX2-43 进行靶点结合实验，测定其与 PRMT5 的亲和力；通过细胞活力检测、细胞表型分析及免疫荧光染色等方法，评估其在不同细胞模型中的活性、选择性及对细胞形态和增殖的影响。
结果:
1.靶点结合亲和力：生物素化 WX2-43(0.1 nM–10 μM，孵育 2 小时)可与 PRMT5 特异性结合，其解离常数(Kd)为 11.0 nM 。
2.细胞活力抑制：WX2-43(0.03–10 μM，作用 24 小时)可在经顺铂处理的 MEFs 细胞中，以 KLF4 依赖的方式抑制细胞活力 。
3.细胞选择性：WX2-43 在三阴性乳腺癌(TNBC)细胞系中表现出更强的活性(EC₅₀ 为 0.44–0.96 μM)，显著高于正常乳腺上皮细胞系(EC₅₀ 为 3.62–23.34 μM)[1]。
4.细胞表型与增殖影响：WX2-43 可在二维(2D)AKPS 培养体系中诱导细胞呈现间充质样表型，改变克隆形态与大小，重塑肌动蛋白细胞骨架，并降低 Ki-67+ 增殖细胞的频率 [2]。

方法:对三阴性乳腺癌荷瘤裸鼠进行腹腔注射给药，观察 WX2-43 对体内肿瘤生长的抑制作用。
结果:WX2-43(40–80 mg/kg，腹腔注射，每周 2 次，持续 4 周)可显著抑制裸鼠体内三阴性乳腺癌的肿瘤进展 [1]。