一、 细菌生长监测

1. 培养细菌：在适宜的培养基中培养目标细菌。
2. 添加NADA-green探针：在细菌培养液中添加NADA-green，通常浓度为1-10 µM，允许探针整合进细菌的肽聚糖合成过程中。
3. 荧光监测：通过荧光显微镜或流式细胞仪实时监测细菌生长。NADA-green 在探针与肽聚糖合成结合后，会在特定波长下发出荧光（通常为绿光，λex 490 nm, λem 520 nm），可以用来评估细菌细胞壁的合成进程。
4. 数据分析：记录细菌生长过程中的荧光强度变化，并结合细菌数量变化进行分析。
   二、细菌细胞壁合成研究
5. 添加NADA-green到培养基中：在细菌生长的不同阶段，加入NADA-green，观察不同条件下细胞壁合成的变化。
6. 荧光显微镜分析：使用荧光显微镜观察细胞壁的合成及其空间分布，可以得出细菌肽聚糖合成的区域性信息。
7. 实验条件优化：根据需要，调整探针浓度、温度、培养时间等因素，进一步研究细菌生长和细胞壁合成的关系。
   三、 抗生素作用机制研究
8. 添加NADA-green和抗生素：在细菌培养中同时添加NADA-green探针和抗生素。
9. 监测荧光变化：通过荧光显微镜或流式细胞仪监测细菌生长过程中荧光的变化，从而分析抗生素的作用。
10. 分析抗生素效果：通过比较实验组与对照组的荧光强度，判断抗生素对细胞壁合成的影响。
    四、 细菌群体生长动态分析
11. 共培养多种细菌：在同一培养基中共培养不同种类的细菌。
12. 添加NADA-green：向培养基中添加NADA-green探针，以监测不同细菌种群的生长和肽聚糖合成。
13. 荧光显微镜观察：使用荧光显微镜进行多种细菌群体的成像，分析不同种类细菌的细胞壁合成情况。