N-(2-hydroxyethyl)-Naphthalimide is a fluorescent probe for nucleic acid detection whose fluorescence can be burst.

一、核酸检测中的应用
1. 材料准备
(1) HEN探针：溶解于适当的有机溶剂（如DMSO或乙醇），建议使用浓度为1-10 µM。
(2) 样品：提取的DNA/RNA，或用于体外合成的单链核酸（如特定的寡核苷酸）。
(3) 缓冲液：适用于核酸反应的缓冲液（如Tris-HCl，pH 7.5）。
2. 实验步骤
(1) 荧光检测体系建立：
配制反应体系，包括HEN探针和目标核酸，确保混合均匀。
探针与核酸的结合可以通过形成复合物或改变周围环境猝灭荧光信号。
(2) 荧光信号监测：
在荧光光谱仪上记录荧光强度变化，激发波长通常为350-400 nm，发射波长为450-500 nm。
通过荧光信号变化评估核酸浓度或反应动力学。
(3) 核酸比对实验：
对比目标核酸序列与非特异性核酸序列，验证探针的选择性和特异性。
c. 数据分析
使用荧光信号强度变化（或猝灭效率）绘制荧光滴定曲线，并通过非线性拟合计算目标分子浓度。
二、荧光成像
实验步骤：
(1) 将HEN探针加载到细胞培养基中，与活细胞孵育。
(2) 使用荧光显微镜观察探针在细胞核或细胞质中的分布，记录荧光强度。
(3) 针对特定的核酸靶点，可以通过添加RNA/DNA酶进行对照实验，验证探针的结合特异性。