Msr-Ratio (Msr-green) (Msr-green) is a ratiometric fluorescent probe specifically designed for the detection of methionine sulfoxide reductase (MSR) activity. It has an excitation wavelength of 375 nm and an emission wavelength of 550 nm. This probe offers the ability to monitor the enzyme activity both in vitro and in live cells, making it a valuable tool for studying MSR function.

Msr-Ratio通过蛋氨酸亚砜还原酶转化为其相应的硫化物形式。Msr-Ratio展现出诸多优异性质，包括近400倍的荧光变化、快速的响应率（<30分钟）、大的斯托克斯位移（120nM）以及绿色发射（550nM）[1]。在活体HL60细胞中加入Msr-Ratio后，背景信号极弱。随着Msr-Ratio（10μM）在细胞中的孵育时间从0增加到8小时，荧光信号持续增强[1]。

使用方法
一、 溶液制备
1.储备液：根据制造商的说明书或文献，将 Msr-Ratio（Msr-green）溶解于适当的溶剂中（通常使用 DMSO 或去离子水），制备为适当浓度的储备液，常见浓度为 1–10 mM。
2.工作液：将储备液根据实验需要稀释至工作浓度，通常为 1–10 µM。建议使用适当的缓冲溶液（如 PBS）进行稀释。
二、操作步骤
1.细胞染色：将适量的 Msr-Ratio 工作液加入到细胞培养基中，孵育0-8h，温度通常设定在37°C。在此过程中，探针会进入细胞并与MSR作用。
2.洗涤：孵育结束后，用 PBS 或其他适当的缓冲液洗涤细胞，去除未结合的探针。
3. 荧光检测：激发与发射波长：Msr-Ratio (Msr-green) 在375 nm激发下发射荧光，发射波长为550 nm。可以使用荧光显微镜、流式细胞仪或其他具有适当滤光片的荧光检测仪器进行观察和定量分析。
4. 比率测定：MSR的活性变化将引起荧光信号的比率变化。通过监测荧光信号的比值，能够评估MSR活性的变化。
5. 应用领域：
1）酶活性监测：Msr-Ratio（Msr-green）可用于研究MSR在细胞中的活性，特别是在与细胞氧化还原状态、硫氧还原反应相关的研究中。
2） 氧化还原研究：该探针在细胞内的氧化还原状态变化上具有较高的灵敏度，适用于细胞内氧化应激、衰老、疾病状态下的研究。
3）细胞信号传导：MSR作为关键酶之一，与细胞的多种生理过程（如抗氧化防御）相关，Msr-Ratio可用于监测MSR的参与。
注意事项：
1.光敏性：Msr-Ratio对光敏感，使用时应避免长时间暴露在强光下。
2.储存条件：该探针应储存于-20°C，并避免反复冻融。
3.溶解性：Msr-Ratio（Msr-green）应完全溶解，溶液中不可有沉淀。