Celltrack Deep Red的制备：首先，将其溶解于DMSO中，终浓度为1 mM（避光分装保存）。然后，用无血清培养基稀释至250 nM至1 µM的工作浓度，并将工作溶液预热至37 ℃。对于细胞标记，悬浮细胞的染色步骤包括：离心收集细胞，移除上清液，再将细胞轻轻重悬于预热的工作溶液中，并在适合细胞类型的条件下孵育15至45分钟。接着，离心细胞并去除染料，然后更换为新鲜培养基，并通过荧光显微镜进行检查，Ex/Em = 630/650 nm。贴壁细胞的染色步骤为：去除培养基，加入预热的工作溶液，孵育15至45分钟后，去除工作溶液，更换为新鲜培养基，并使用相同波长进行荧光检查。注意事项包括根据实际调整工作液浓度、孵育温度和时间，尽量降低染料浓度以保持细胞的正常生理状态并减少伪影，避免使用含氨基或硫醇基团的缓冲液。