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常见问题解答
问细胞实验中需要加多少抑制剂？
答通常建议您参考同模型实验发表的文献报道；除参考文献报道以外，还需要通过预实验做“剂量-效应曲线”确定最佳作用浓度（浓度梯度）；通过“时间-效应曲线”确定最佳孵育时间（处理时间梯度）。另外，抑制剂的使用量受多种因素影响，包括抑制对象的可接触性、细胞通透性、孵育时间、细胞种类等等。我们建议通过检索文献确定使用抑制剂的起始浓度。
如果有报道的 Ki 值或 IC50 值，可以采用其 5-10 倍的量开始尝试以达到抑制酶活性的最佳效果。
如果抑制剂的 Ki 值或 IC50 值未知，则需要在更广泛的范围尝试抑制剂的使用浓度，并采用 Michaelis-Menten 动力学计算 Ki 值。
一般设立溶解抑制剂时所采用的溶剂作为对照，以排除溶剂的非特异性影响。
问是否能直接用缓冲液对抑制剂 DMSO 母液做梯度稀释？
答大部分情况下，都是可以溶解的。但有时，有机试剂直接加入水相介质时会析出。建议将抑制剂先以DMSO做梯度稀释，再将经过稀释的抑制剂加入缓冲液或细胞培养基。有些抑制剂甚至只有在其工作浓度下才能溶于水相。
比如细胞实验中希望终浓度为 1 μM 的话，可以把 10 mM 的 DMSO 母液用 DMSO 稀释到 1 mM，再吸 2 μL 加入到 2 mL 的生理盐水/PBS/细胞培液，终浓度即为 1 μM。
为避免药物析出，稀释前，可将母液和培养基 37℃ 预热，避免温度低造成严重析出。若稀释过程中出现化合物析出的情况，建议您采用超声加热的方法使其复溶。
问得到的杀死细胞的 IC50 与网页上 IC50 差距较大怎么办？
答您所测试的IC50是指细胞的增殖抑制实验（半抑制率），细胞增殖抑制实验 IC50值，和网页上的靶点IC50其实是不同的意义。文献里和网页上 IC50其实往往是指对于靶点无细胞实验的抑制率，这样的实验一般是通过激酶或者蛋白纯化实验做出来的，nM 级别的浓度比较常见，但是细胞的增殖抑制实验 IC50 是指细胞的半致死率，同时牵涉到细胞的代谢以及渗透，一般浓度会高一些。
另外，同一个化合物对不同细胞模型的效果也是不同的，建议尝试增加孵育量、延长孵育时间。
问抑制剂是否可以高温灭菌？
答大部分产品均通过化学方法合成，反应条件一般在 50-80℃ 之间，因此不建议使用高温灭菌法进行灭菌，建议用 0.22 μm 滤膜过滤灭菌。
问PEG300 可以用 PEG400 替代吗？
答PEG300 具有适度的粘稠度，有利于药物的溶解和给药过程，同时也能够提供良好的耐受性，不会对动物造成不良影响。PEG400 可以替代 PEG300。
PEG600 不是很建议，因为熔点接近常温。
