在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物，再与 N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物，在 540nm 处有特征吸收峰。

100T/96S规格的产品组成及保存条件：

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水。

二、样品处理：
1.土壤样品：准确称取过筛后的土壤约 0.5g，加入 1 mL CB0145M-ES，室温震荡 1h，8000g，25℃离心 15min，静置，待其分层后，取上清液待测。
2.水样：直接检测；如果浑浊，可以离心后再测定。

三、测定步骤：
1.分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。
2.将标准品用蒸馏水稀释成 0.04µmol/mL（取CB0145M-标准浓缩液用蒸馏水25倍稀释即可）。
3.在 EP 管中依次加入下列试剂：

四、亚硝酸盐含量计算：
1.土壤样品：
NO2^- (μmoL/g) = (A 样本-A空白)÷[(A标准-A空白)÷C 标准] ×V样品÷(W×V样品÷V提) = 0.04×(A 样本-A空白)÷(A标准-A空白)÷W
2.水样：
NO2^- (μmoL /mL) = (A 样本-A空白)÷[(A标准-A空白)÷C 标准]
注： C 标准：标准溶液浓度，0.04µmol/mL；V提：提取液体积，1mL；W：样本质量，g。

1.若检测出得 OD 值在标准曲线范围外，请将样品进行适当的浓缩或稀释（A540 <0.05 浓缩，A540 > 1.6 适当稀释）。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3.试剂对人体有一定的危害，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。