Triglyceride Content Assay Kit (Spectrophotometry)

用异丙醇抽提取 TG，KOH 皂化 TG 后水解生成甘油及脂肪酸，过碘酸氧化甘油生成甲醛，在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质，在 420 nm 有特征吸收峰，其颜色的深浅与 TG 含量成正比。

50T/48S规格的产品组成及保存条件：

一、自备用品：
可见分光光度计、1ml玻璃比色皿、水浴锅、可调式移液枪、双蒸水、正庚烷、异丙醇以及玻璃空瓶。

二、TG 的提取：
1.组织中 TG 的提取：按照组织质量（g）：CB0117S-A体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL CB0117S-A）进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心 10min，取上清，即 TG待测液。
2.细胞、细菌中 TG 的提取：先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加 1mL CB0117S-A，超声波破碎 1min（强度 20％，超声 2s，停 1s），8000g，4℃离心 10min，取上清，即 TG 待测液。
3.血清（浆）样品：直接测定。

三、测定步骤：
1.分光光度计预热 30min，调节波长到 420 nm，蒸馏水调零。
2.水浴锅预热到 65℃。
3.在EP 管中按照下表操作：

4.甘油三酯含量测定：

四、计算公式：
1.血清(浆)中甘油三酯含量计算：
TG含量 (mg/dL) = C标准品×(A测-A空)÷(A标-A空)×100 =100×(A测-A空)÷(A标-A空)
C标准品：1mg/mL；100：单位换算系数，1dL=100 mL。
2.组织中甘油三酯含量计算：
(1)按样本蛋白浓度计算
TG含量 (mg/ mg prot) = C标准品×V× (A测-A空)÷(A标-A空)÷(Cpr×V)=(A测-A空)÷(A标-A空)÷Cpr
(2)按样本质量计算
TG含量 (mg/g) = C标准品×V×(A测-A空)÷(A标-A空)÷W = (A测-A空)÷(A标-A空)÷W
C标准品：1mg/mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；V：加入CB0117S-A的体积，1mL。
3.细胞、细菌中甘油三酯含量计算：
TG含量 (mg/10⁴ cell) = C标准品×(A测-A空)÷(A标-A空)÷细菌或细胞密度(10⁴ cell/mL) = (A测-A空)÷(A标-A空)÷细菌或细胞密度(10⁴ cell/mL)
C标准品：1mg/mL。
注意事项：
1.试剂盒中有易挥发性物质，实验过程中需佩戴手套和口罩，试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。
2.加试剂CB0117S-B后需剧烈震荡，使待测液中甘油三酯得到充分提取，振荡幅度、时间、反复次数以及等待分层时间均应保证一致。
3.为保证试验的重复性，每次水浴后的冷却时间要统一。
4.若测定管 OD 值大于 1 时，建议将样本用CB0117S-A适当稀释后再进行检测，并在计算时需乘以相应的稀释倍数。

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。