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Triglyceride Content Assay Kit (Spectrophotometry)

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货号 CB0117S

别名 甘油三酯(TG)含量检测试剂盒(分光光度法)

甘油三酯(Triglyceride, TG)是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。

Triglyceride Content Assay Kit (Spectrophotometry)

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货号 CB0117S 别名 甘油三酯(TG)含量检测试剂盒(分光光度法)

甘油三酯(Triglyceride, TG)是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。

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50 T
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Handling Instruction | TargetMol 检测原理

用异丙醇抽提取 TG,KOH 皂化 TG 后水解生成甘油及脂肪酸,过碘酸氧化甘油生成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质,在 420 nm 有特征吸收峰,其颜色的深浅与 TG 含量成正比。

Handling Instruction | TargetMol 产品规格

50T/48S规格的产品组成及保存条件:

编号 规格 储存条件
CB0117S-A 100mL×1瓶(自备) 4℃保存;
CB0117S-B 7mL×1 支 4℃保存;
CB0117S-C 30ml×1瓶 4℃保存;
CB0117S-D 10mL×1瓶 4℃避光保存;
CB0117S-E 30ml×1瓶 4℃避光保存;
CB0117S-F 30ml×1瓶 4℃避光保存;
CB0117S-Standard 粉末×1支 -20℃保存;临用前加 1mL CB0117S-A,即为1mg/mL标准甘油三酯溶液,4℃避光保存。
CB0117S-A配制:自备玻璃空瓶,正庚烷和异丙醇按体积比 9:16 混合,盖紧后混匀

Handling Instruction | TargetMol 操作说明

一、自备用品:
可见分光光度计、1ml玻璃比色皿、水浴锅、可调式移液枪、双蒸水、正庚烷、异丙醇以及玻璃空瓶。

二、TG 的提取:
1.组织中 TG 的提取:按照组织质量(g):CB0117S-A体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL CB0117S-A)进行冰浴匀浆,8000g,4℃离心 10min,取上清,即 TG待测液。
2.细胞、细菌中 TG 的提取:先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加 1mL CB0117S-A,超声波破碎 1min(强度 20%,超声 2s,停 1s),8000g,4℃离心 10min,取上清,即 TG 待测液。
3.血清(浆)样品:直接测定。

三、测定步骤:
1.分光光度计预热 30min,调节波长到 420 nm,蒸馏水调零。
2.水浴锅预热到 65℃。
3.在EP 管中按照下表操作:

试剂名称 空白管(µL) 标准管(µL) 测定管(µL)
蒸馏水 200
1mg/ml标准品 200
TG待测液 200
CB0117S-A 625 625 625
加 CB0117S-A 后充分混匀,再加 CB0117S-B
CB0117S-B 125 125 125
剧烈振荡 30s,静置 3-5min 后再剧烈震荡 30s,如此反复 3 次,待分层后取上层溶液
150μL,置于新的 EP 管中。

4.甘油三酯含量测定:

试剂名称 空白管(µL) 标准管(µL) 测定管(µL)
上层溶液 150 150 150
CB0117S-C 500 500 500
CB0117S-D 150 150 150
充分混匀,65℃水浴3min,冷却
CB0117S-E 500 500 500
CB0117S-F 500 500 500
充分混匀,65℃水浴15min,待冷却后, 测定 420nm 处吸光值,记为 A 空,A 标和 A
测。
注意:空白管和标准管只需测定1-2次。

四、计算公式:
1.血清(浆)中甘油三酯含量计算:
TG含量 (mg/dL) = C标准品×(A测-A空)÷(A标-A空)×100 =100×(A测-A空)÷(A标-A空)
C标准品:1mg/mL;100:单位换算系数,1dL=100 mL。
2.组织中甘油三酯含量计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
TG含量 (mg/ mg prot) = C标准品×V× (A测-A空)÷(A标-A空)÷(Cpr×V)=(A测-A空)÷(A标-A空)÷Cpr
(2)按样本质量计算
TG含量 (mg/g) = C标准品×V×(A测-A空)÷(A标-A空)÷W = (A测-A空)÷(A标-A空)÷W
C标准品:1mg/mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g;V:加入CB0117S-A的体积,1mL。
3.细胞、细菌中甘油三酯含量计算:
TG含量 (mg/104 cell) = C标准品×(A测-A空)÷(A标-A空)÷细菌或细胞密度(104 cell/mL) = (A测-A空)÷(A标-A空)÷细菌或细胞密度(104 cell/mL)
C标准品:1mg/mL。
注意事项:
1.试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。
2.加试剂CB0117S-B后需剧烈震荡,使待测液中甘油三酯得到充分提取,振荡幅度、时间、反复次数以及等待分层时间均应保证一致。
3.为保证试验的重复性,每次水浴后的冷却时间要统一。
4.若测定管 OD 值大于 1 时,建议将样本用CB0117S-A适当稀释后再进行检测,并在计算时需乘以相应的稀释倍数。

Handling Instruction | TargetMol 注意事项

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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