Name: Sucrose Synthase(SS-I) Assay Kit (Microanalysis)
Brand: TargetMol
SKU: CB0250M
Rating: 5 (4 reviews)

规格

价格

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数量

100 T

¥ 1,814

4-6日内发货

产品规格

100T/48S规格的产品组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
CB0250M-ES	100mL×1瓶	4℃保存；
CB0250M-A	10mL×1瓶	4℃保存；
CB0250M-B	5ml×1瓶	4℃保存；
CB0250M-C	粉剂×2支	-20℃保存；临用前每支加入1.2mL CB0250M-B充分溶解待用，现配现用；
CB0250M-D	6mL×1瓶	4℃保存；
CB0250M-Standard	粉剂×1支	临用前加入 1 mL 蒸馏水溶解，配成 20 mg/mL 果糖溶液备用，4℃保存一周。

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

操作说明

一、自备用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰。

二、样本的前处理：
1.按照组织质量（g）：CB0250M-ES体积（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL CB0250M-ES），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
2.将 20mg/mL 标准液用蒸馏水稀释为 8、6、5、4、3、2、1mg/mL 的标准溶液备用。
3.样本测定，（在EP管中依次加入下列试剂）：

试剂名称	测定管（μL）	对照管（μL）	标准管（μL）	空白管（μL）
样本	10	10
标准溶液			10
蒸馏水				10
CB0250M-C	40
CB0250M-A		40	40	40
混匀，30℃准确水浴30min后，95℃水浴10min，冷却至室温
CB0250M-D	50	50	50	50
95℃水浴5min左右，冷却至室温
蒸馏水	400	400	400	400
混匀，取200μL 至微量石英比色皿或96孔板中，540nm下测定各管吸光值。分别记为 A对照管，A 测定管，A标准管，A空白管。计算 ΔA=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。每个测定管需设一个对照管（标准曲线只需检测 1-2 次）。每个测定管需要设一个对照管。

四、SS-Ⅰ活性计算：
1.标准曲线的绘制：
根据标准管的浓度(x，mg/mL)和吸光度ΔA标准(y，ΔA标准)，建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA测定(y，ΔA测定)带入公式计算样本浓度(x，mg/mL)。
2.SS-Ⅰ活性的计算:
(1)按照蛋白浓度计算
单位定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1μg 还原糖定义为一个酶活力单位。
SS-Ⅰ活性 (μg/min/mg prot) = [x×V反总]÷(V样×Cpr)÷T = 0.17÷Cpr
(2)按照样本鲜重计算
单位定义：每g组织每分钟催化产生1μg 还原糖定义为一个酶活力单位。
SS-Ⅰ活性 (μg /min/g鲜重) = [x×V反总]÷(W× V样÷V样总)÷T = 0.17÷W
注：V反总：反应体系总体积，0.05mL；V样：加入样本体积，0.01 mL；V样总：加入提取液 (CB0250M-ES) 体积，1 mL；T：反应时间，30 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。

注意事项

1.蛋白定量测定，建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。