Sorbitol Assay Kit (Microanalysis)

山梨醇在碱性溶液中与铜离子形成蓝色络合物，在 655nm 波长有特征吸收峰。

100T/96S规格的产品组成及保存条件：

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。

二、山梨醇的提取：
1.组织样品的制备：
按照组织质量（g）：蒸馏水体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.2g 组织，加入 1mL蒸馏水），研磨成匀浆，95℃水浴 10 分钟（盖紧，以防止水分散失），冷却后，8000g，25℃离心 10min，取上清液待测。
2.血清（浆）：直接检测。

三、测定步骤：
1.分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 655nm，蒸馏水调零。
2.微量石英比色皿或 96 孔板中依次加入下列试剂：

混匀后室温静置 15min，8000g，25℃离心 10min，取 200μL 上清液至微量石英比色皿或 96孔板中，测 655nm 下吸光值 A，计算 ΔA=A测定管-A空白管。空白管只要做一管。

四、山梨醇含量计算：

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1.标准条件下测定回归方程为 y = 0.352x - 0.002；x 为标准品浓度(mg/mL)，y 为吸光值。
2.按照样本质量计算
山梨醇含量 (mg/g 鲜重) = [(ΔA＋0.002)÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2) =2.84×(ΔA＋0.002)÷W
3.按照样本蛋白浓度计算
山梨醇含量 (mg/mg prot) = [(ΔA＋0.002)÷0.352×V1]÷(V1×Cpr) =2.84×(ΔA＋0.002)÷Cpr
注：V1：加入样本体积，0.23mL；V2：加入提取液体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；

b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
1.标准条件下测定回归方程为 y = 0.176x - 0.002；x 为标准品浓度(mg/mL)，y 为吸光值。
2.按照样品质量计算
山梨醇含量 (mg/g 鲜重) = [(ΔA＋0.002)÷0.176×V1]÷(W×V1÷V2) =5.68×(ΔA＋0.002)÷W
3.按照样本蛋白浓度计算
山梨醇含量 (mg/mg prot) = [(ΔA＋0.002)÷0.176×V1]÷(V1×Cpr) =5.68×(ΔA＋0.002)÷Cpr
注： V1：加入样本体积，0.23mL；V2：加入提取液体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；

1.最低检测限为 1μg/g 鲜重或 0.01μg /mg prot
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。