Soil Dehydrogenase Assay Kit (Visible Spectrophotometry)

氢受体 2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑 (2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC) 在细胞呼吸过程中接受氢以后，被还原为三苯基甲鐟 (Triphenyl Formazone, TF)，TF呈现红色，在波长 485nm 处有最大吸收峰，采用分光光度法于 485nm 测定其吸光值，即得土壤脱氢酶活性。

50T/24S规格的产品组成及保存条件：

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
可见分光光度计、1ml玻璃比色皿，30-50目筛、天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、冰、蒸馏水、丙酮（不允许快递，请用户自备）。

二、样品处理：
1.土壤样品：准确称取过30-50目筛的新鲜土壤样品约 0.1g（以保证 TTC 与土壤颗粒充分接触）。
2.污泥样品：污泥用蒸馏水洗涤，10000g，25℃，离心 10 min，弃上清，反复3- 4 次。

三、测定步骤：
1.分光光度计预热 30min，调节波长至 485nm，蒸馏水调零。
2.在 EP 管中依次加入下列试剂：

四、脱氢酶活力计算：
酶活单位定义：在37℃时，每克样品每小时使每ml反应体系 OD 值每增加0.01为一个酶活单位。
S-DHA 活性 (U/g) = (ΔA÷0.01)÷T÷样品质量(g) = 166.7×ΔA
注：T：反应时间，6 h；W：样本质量，0.1g

1.配制好的CB0154V-A避光保存于 4℃，最好在一周内使用，若出现红色，则不能使用。
2.反应完成后立即冰浴以终止反应，并去除干净残留的反应液。
3.如果测定出来的吸光值较大，减少样品用量再进行测定；若吸光值过小则延长培养时间，并同步修改计算公式。
4.如果离心后待测的上清依然浑浊，可尝试加大离心转速或延长时间。
5.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
6.CB0154V-C易挥发，有毒，为了您的健康，请穿实验服，戴口罩，戴乳胶手套操作。