Name: Lys Assay Kit (Visible Spectrophotometry)
Brand: TargetMol
SKU: CB0227V
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规格

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50 T

¥ 858

4-6日内发货

检测原理

蛋白质中的赖氨酸具有一个游离的ε-NH2，它与茚三酮试剂反应生成蓝紫色物质，其颜色的深浅在一定范围内与赖氨酸的含量成线性关系。亮氨酸与赖氨酸的碳原子数目相同，而且仅有一个游离氨基(ε-NH2)，所以通常用亮氨酸配制标准液。

产品规格

50T/48S规格的产品组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
CB0227V-ES	50mL×1瓶	4℃保存；
CB0227V-A	粉剂×1瓶	4℃保存；临用前加入12.5mL CB0227V-C充分溶解混匀；
CB0227V-B	12.5mL×1瓶	4℃保存；
CB0227V-C	15mL×1瓶	4℃保存；
CB0227V-D	60%乙醇，自备
CB0227V-Standard	粉剂×1支	临用前加入 1 mL CB0227V-ES溶解配制成 1 mg/mL 的标准溶液；4℃保存

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

操作说明

一、自备用品：
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰、蒸馏水、60%乙醇、水浴锅。

二、赖氨酸提取：
样本烘干粉碎，称取约0.01g样本，加入1mL CB0227V-ES，充分匀浆。80℃水浴提取20min，冷却后10000g离心10min，取上清待测。

三、测定步骤：
1.分光光度计预热30min以上，调节波长至580nm，蒸馏水调零。
2.工作液的配制：取10mL CB0227V-A与10mL CB0227V-B混合摇匀，取上清备用。用不完的试剂4℃保存。
3.标准稀释液的制备：将1 mg/mL标准液使用CB0227V-ES稀释至0.1mg/mL即为标准稀释液。
4.样本测定（在有盖EP管中加入下列试剂）：

试剂名称	测定管（μL）	空白管（μL）	标准管（μL）
样本	200
CB0227V-ES		200
标准溶液			200
工作液	400	400	400
混匀，80℃水浴30min（盖紧，以防止水分散失），冷却至常温。
CB0227V-D	600	600	600
混匀，取1000μL至1mL玻璃比色皿中，于580nm波长处记录吸光值A。分别记为 A空白管、A标准管、A测定管。计算ΔA标准=A标准管-A空白管，ΔA测定=A测定管-A空白管。标准管和空白管只需测 1-2 次。

四、赖氨酸含量计算：
1.按样本蛋白浓度计算：
赖氨酸含量 (mg/mg prot) =ΔA测定÷ΔA标准×C标准液×V提取÷Cpr×1.1515=0.11515×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr
2.按样本质量计算：
赖氨酸含量(mg/g干重) =ΔA测定÷ΔA标准×C标准液×V提取÷W×1.1515=0.11515×ΔA测定÷ΔA标准÷W
C标准液：标准液浓度，0.1mg/mL；V提取：提取液体积，1mL；W：样本质量，g；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；1.1515，校正系数。

注意事项

1.蛋白定量测定，建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。