Hemicellulose Assay Kit (Microanalysis)

Name: Hemicellulose Assay Kit (Microanalysis)
Brand: TargetMol
SKU: CB0236M
Rating: 5 (4 reviews)

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产品编号 CB0236M

别名 半纤维素含量检测试剂盒（微量法）

半纤维素（hemicellulose）是植物细胞壁中与纤维素紧密结合的多糖混合物，是构成细胞初生壁的主要成分，广泛存在于植物中，是一种新型可利用能源。

规格	价格	库存	数量
100 T	¥ 1,555	10-12日内发货

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实验操作小课堂

常见问题解答

检测原理

半纤维素在一定条件下水解为还原性糖类，还原糖在碱性条件下与3，5-二硝基水杨酸（DNS）加热被氧化成糖酸及其它产物，DNS则被还原为棕红色3-氨基-5-硝基水杨酸，在540nm处具有特征吸收峰，通过吸光值的变化即可定量检测半纤维素的含量。

产品规格

100T/96S规格的产品组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
CB0236M-A	60mL×1瓶	常温保存
CB0236M-B	60mL×1瓶	常温保存
CB0236M-C	10mL×1瓶	4℃保存
CB0236M-Standard	粉剂×1支	4℃保存；临用前加入1mL蒸馏水溶解配制成 10 mg/mL的标准溶液，4℃可保存4周

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

操作说明

一、自备用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅、天平、30-50目筛、80%乙醇、烘箱、蒸馏水、EP管。

二、样品处理：
样本自然风干或用烘箱烘干至恒重，研钵充分研磨后，过 30~50 目筛。

三、测定步骤：
1.分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
2.标准液的稀释：将10 mg/mL的标准溶液用蒸馏水稀释至1、0.9、0.8、0.6、0.4、0.2 mg/mL标准溶液待测。
3.加样表（在EP管中依次加入下列试剂）：

试剂名称	空白管（μL）	测定管（μL）	标准管（μL）
样本		0.05g
80%乙醇		1000
90℃水浴10min，25℃，8000g离心10min，弃上清留沉淀
蒸馏水		1000
充分混匀，25℃，8000g离心10min，弃上清，此步骤重复3次，取沉淀，烘干至恒重
CB0236M-A	500	500
90℃水浴1h，自然冷却至室温
CB0236M-B	500	500
混匀，25℃，8000g离心10min，取上清待测
上清	80	80
标准液			80
CB0236M-C	80	80	80
蒸馏水	160	160	160
充分混匀，90℃水浴5min，自然冷却至室温
取 200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板中，于 540nm 测定吸光值 A，分别记为 A空白、A测定、A标准，计算 ΔA标准=A标准-A空白，ΔA测定=A测定-A空白。标准曲线和空白管只需测定 1-2 次。

四、酶活性计算公式：
1．标准曲线的绘制：
根据标准管的浓度(y，mg/mL)和吸光度ΔA标准(x，ΔA标准)，建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA测
定(x，ΔA测定)带入公式计算样本浓度(y，mg/mL)
2.半纤维素含量的计算：
半纤维素含量(mg/g 干重)= y×V样总÷W×F= y÷ W×F
V样总：加入提取液体积，1 mL；W：样本质量，g；F：稀释倍数。

注意事项

1.如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
2.建议将加入CB0236M-B离心后的上清液稀释10~20倍后检测，计算公式中注意乘以稀释倍数。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。