H2S Assay Kit (Microanalysis)

H₂S与醋酸锌、N, N-二甲基对苯二胺和硫酸铁铵等反应生成亚甲基蓝，亚甲基蓝在 665nm 处 有最大吸收峰，通过测定其吸光值可计算H₂S含量。

100T/96S规格的产品组成及保存条件：

一、自备用品：
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水。

二、使用说明： 
样品处理：
1.组织：按照组织质量（g）：CB0101M-ES体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL CB0101M-ES）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2.细菌、真菌：按照细胞数量（10 ⁴ 个）：CB0101M-ES体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议500万细胞加入1mL CB0101M-ES），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声3 秒，间隔7秒，总时间 3min）；然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3.血清（浆）：直接测定。

三、测定步骤：
（取1.5ml 离心管，按照下表操作）

四、H₂S 含量计算公式：
(一)用微量玻璃比色皿测定的计算公式如下：
标准曲线回归方程为：y = 0.0044x，R² = 0.9988
1.组织样品：
a.按照蛋白浓度计算：
H₂S (μmol/mg prot) = A₆₆₅ ÷ 0.0044 × V反总 ÷ (V样×Cpr) × 10-3 = 0.727 × A₆₆₅÷Cpr
b. 按照样本重量计算：
H₂S (μmol/g) = A₆₆₅ ÷ 0.0044 × V反总 ÷ (V样 ÷ V样总 × W) × 10-3 = 0.727 × A₆₆₅ ÷ W
2.液体样本：
H₂S (μmol/L) = A₆₆₅ ÷ 0.0044 × V反总÷V样 = 727 × A₆₆₅
3.细胞样本：
H₂S (μmol/10⁴ cell) = A₆₆₅ ÷ 0.0044 ×V反总 ÷ (V样÷V样总×细胞数量(万个)) × 10^-3 = 0.727 × A₆₆₅ ÷ 细胞数量(万个)
注：V反总：反应总体积，0.24mL；V样：反应中样品体积，0.075mL；V样总：加入提取液体积，1mL；W：样品质量，g；Cpr：蛋白浓度，mg/mL。
(二)用 96 孔板测定的计算公式如下：
标准曲线回归方程为：y = 0.0022x，R² = 0.9988
1.组织样品：
按照蛋白浓度计算：
H₂S (μmol/mg prot) = A₆₆₅ ÷ 0.0022 × V反总 ÷ (V样×Cpr) × 10-3 =1.454 × A₆₆₅÷Cpr
b. 按照样本重量计算：
H₂S (μmol/g) = A₆₆₅ ÷ 0.0022 × V反总 ÷ (V样 ÷ V样总 × W) × 10-3 =1.454 × A₆₆₅ ÷ W
2.液体样本：
H₂S (μmol/L) = A₆₆₅ ÷ 0.0022 × V反总÷V样 = 1454 × A₆₆₅
3.细胞样本：
H₂S (μmol/10⁴ cell) = A₆₆₅ ÷ 0.0022 ×V反总 ÷ (V样÷V样总×细胞数量(万个)) × 10^-3 =1.454 × A₆₆₅ ÷ 细胞数量(万个)
注：V反总：反应总体积，0.24mL；V样：反应中样品体积，0.075mL；V样总：加入提取液体积，1mL；W：样品质量，g；Cpr：蛋白浓度，mg/mL。

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。