FDP Assay Kit (Visible Spectrophotometry)

醛缩酶催化果糖1,6-二磷酸降解，产物与DNPH缩合成紫红色物质，在540nm有特征吸收峰。

50T/48S规格的产品组成及保存条件： 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

一、自备用品：
可见分光光度计，1 mL玻璃比色皿，天平，低温离心机，研钵，恒温水浴锅。

二、样品处理：
1.组织：按照质量（g）：CB0077V-A体积（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL CB0077V-A）加入CB0077V-A，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心10min，取上清待测。
2.细胞：按照细胞数量（10⁴个）：CB0077V-A体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL CB0077V-A），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后4℃，10000g离心10min，取上清待测。
3.液体：直接检测。

三、测定步骤：
1.分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
2.将50µmol/mL的果糖-1,6-二磷酸标准液用蒸馏水倍比稀释为3.125、1.5625、0.78125、0.39、0.2、0.1 µmol/mL 的标准溶液备用。
3.在EP管中依次加入下列试剂：

四、计算公式：
1.标准曲线的绘制：
以各个标准溶液的浓度为 x 轴，其对应的 ΔA标准为 y 轴，绘制标准曲线，得到标准方程 y= kx+b，将 ΔA 带入方程得到 x(µmol/mL)。
2.FDP 含量的计算：
(1)按照质量计算
FDP (µg/g 鲜重) =x÷(W÷V样总) = x÷W
(2)按照细胞数量计算
FDP (µg/10⁴ cell) =x÷(细胞数量÷V样总) = x÷细胞数量
(3)按照液体体积计算
FDP (µmol/mL) = x
注：W：样本质量，g；V样总：加入CB0077V-A体积，1mL

1.蛋白定量测定，建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
2.最低检出限为1.72 mg/L。
3.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。