Py-BODIPY-NHS ester is a small molecular dye with strong UV absorption that can be used to label living cells and immobilise cells.

细胞染色实验
一、溶液配制：
1.母液配置：用 382 μL 无水 DMSO 稀释 1mg Py-BODIPY NHS ester 配制成 10 mM 的储备液；（建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存）
2.工作液的配制：用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 Py-BODIPY NHS ester工作液；（根据实验需求选择合适的工作液浓度，现配现用）
二、细胞染色操作步骤：
悬浮细胞:
1. 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL；
2. 加入 1 mL Py-BODIPY NHS ester 工作液，室温孵育 5-30 分钟；
3. 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清；
4. 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟；
5. 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
贴壁细胞:
1. 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上；
2. 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基；
3. 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 5-30 分钟；
4. 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。