DiI (DiIC18(3)) is a lipophilic membrane dye commonly used as a long-term tracer for neurons and other cells. DiI fluoresces very weakly before it enters the cell membrane, and only after it enters the cell membrane can it be excited to emit a strong orange-red fluorescence (λex=549 nm, λem=565 nm).

使用方法：
一、溶液配制
1.母液配置：将DiL使用DMSO配制，浓度为 1-5 mM。
2. 工作液配置：将母液稀释到合适的缓冲液如无血清培养基、HBSS 或 PBS 配制成 1 至 5 μM 的工作液。
二、悬浮细胞
1.1000 g 4℃离心 3-5 分钟，弃上清，PBS洗2次，每次5分钟。细胞密度为 1×10^6/mL。
2.加入 1 mL Di 工作液，室温孵育5-30分钟。
3. 4℃，400g离心3-4分钟，弃上清。
4.用PBS洗涤2次，每次5分钟。
5.用无血清细胞培养基或PBS重悬细胞，荧光显微镜或流式细胞术观察。
三、贴壁细胞
1.在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
2.从培养基上取下盖玻片并吸出多余的培养基。
3.加入100 μL工作液，轻摇使之完全覆盖细胞，室温孵育5-30分钟。
4.用培养基洗两次，每次5分钟。通过荧光显微镜或流式细胞仪观察。