使用方法

1. 选择溶剂DEAC, SE 通常是亲脂性分子，溶于无水 DMSO 或 DMF 中。
   注意事项：保证溶剂无水以避免 SE 基团的提前水解。
2. 样品准备
   待标记的生物分子（如蛋白质、寡核苷酸）需要溶解在适当的缓冲液中（例如 pH 8.3 左右的磷酸盐缓冲液）。
   注意事项：蛋白质需含游离胺基（如 N 端或赖氨酸侧链）可进行偶联。
3. 偶联反应
   1）向溶液中缓慢滴加 DEAC, SE 的 DMSO 溶液（通常是样品浓度的 10 倍摩尔过量）。
   2）在室温或略低于室温（4°C）下反应 1-2 小时，避免光照。
   3）pH 调控在 8-9 之间，确保 N-羧酰亚胺酯（SE）基团的活性。
4. 反应终止和纯化
   1）使用缓冲液调节反应 pH 至中性（7.0），防止后续自发降解。
   2）通过透析、凝胶过滤柱（如 Sephadex G-25）或 HPLC 去除未结合的 DEAC, SE 和副产物。
5. 验证标记
   使用紫外-可见光分光光度计和荧光分光光度计验证标记效率。DEAC 的最大吸收波长：~426 nm；最大发射波长：~480 nm。
   注意事项
   1）储存条件：DEAC, SE 应保存在 -20°C 的干燥环境中，避免光照和湿气。
   2）使用量优化：根据目标分子的特性（如蛋白质的赖氨酸密度）调整 DEAC, SE 的使用量。
   3）避免交叉反应：确保样品中无游离胺干扰标记。