一、Calcein Red AM 工作液的配制
1.母液配置：可以使用 DMSO 配置 5 -10mM 储备液待用。
2.工作液的配置：用预热好的纯的DMEM或 PBS 稀释储备液，配制成 1-10 μM 的 Calcein Red AM 工作液待用。
注意事项：
1）请根据实际情况调整 Calcein Red AM 工作液浓度，且现用现配。
2）未使用完毕的储备液，请存放于-80℃或者-20℃，分装，避光保存，并且注意避免反复冻融。
二、细胞染色
1.悬浮细胞
1）离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×10^6/mL。
2）加入 1 mL 的 Calcein Red AM 工作液，37℃ 孵育 30-45 分钟。
3）400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
4）加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
5）用 1 mL 纯的DMEM或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
2. 贴壁细胞
1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2）从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3）加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，37℃ 孵育 30-45 分钟。
4）吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜或荧光酶标检测仪进行观察。

注意事项

1. 请您根据实际情况调整 Calcein Red AM 工作液浓度与孵育的时间。
2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或其他。
3. 为了您的安全和健康，请您穿实验服并戴一次性手套操作。