Bromobimane (Monobromobimane) is a non-fluorescent substance, but reacts with thiols to produce a fluorescent product.Bromobimane is used as a probe, often in clinical medicine, to test for sulfide levels in blood.

Bromobimane在溶液中（水性或中等极性有机溶剂）与小分子硫醇和活性蛋白质硫醇基团（例如，血红蛋白）发生反应。Bromobimane与硫醇的反应是二级的，并且依赖于pH值，活性亲核体是硫醇盐阴离子。Bromobimane与硫醇盐的反应将非荧光剂转化为水溶性荧光产物。[1] Bromobimane对硫醇的高选择性、快速反应性，其硫醇衍生物的稳定性和荧光产率，通过反相高效液相色谱法易于衍生物的分离，以及细胞穿透性和非穿透性形式的可获得性，使得使用Bromobimane成为分析低分子量生物硫醇的一种极其有效的方法。[2]

使用方法
一、溶液制备：
1.母液配置：将Bromobimane溶解于适当的溶剂中，如无水DMSO、DMF或甲醇，制备成所需浓度的储备液。
2.工作液配置：建议储备液的浓度为100 mM，以便于后续稀释使用。将储备液稀释至工作浓度，通常为10-50 μM。
二、操作步骤
细胞染色
1.将细胞培养至适当密度;用PBS洗涤细胞，去除培养基。
2.将稀释后的Bromobimane溶液加入细胞中，37℃避光孵育15-30分钟。
3.孵育后，用PBS洗涤细胞3次，去除未结合的染料。
4.荧光检测：使用荧光显微镜或流式细胞仪进行检测。Bromobimane的激发波长约为390 nm，发射波长约为478 nm。
注意事项：
1）操作时需戴手套，避免皮肤或粘膜与试剂接触。
2）孵育和储存过程中应避免光照，以防荧光淬灭。
3）染色完成后，应立即进行荧光检测分析。