Human CD3/CD28 T Cell Activation Beads产品问题解答问阳选与阴选的区别?
答阴选是磁珠结合非目的细胞并去除,阳选则是磁珠结合目的细胞,以此分离。阳选需要磁珠和目的细胞解离,但是阴选不用。阴选对细胞伤害小,且纯度一般较高。
问小鼠CD8+细胞分选试剂盒(阳选法)(C0068)可以从B6(小鼠)的肾脏提取CD8+T细胞吗?是否能达到脾脏的纯度和分选率?
答理论上阳选可以提取,但我们没有具体实验数据,不能保证效果。
问小鼠CD4+ T细胞磁珠法分选试剂盒(阴选法)(C0062)可以用胸腺细胞吗?分选效率低的原因?
答不建议使用胸腺样本,阴选试剂盒对样本要求比较严格,只适合脾脏和淋巴结。
阴选是拉走非目的细胞,胸腺中非目的细胞的种类可能多于脾脏和淋巴结,所以效率低。
可以试用阳选试剂盒(C0067),但分选出来的是CD4+细胞(包含CD4+T细胞),不全是CD4+T细胞。
问小鼠CD8+T细胞磁珠法分选试剂盒(C0063)可以用于肿瘤细胞吗?
答不可以。适用于小鼠脾脏和淋巴结CD8+T细胞。
原因:阴选法是磁珠吸附非目的细胞,比如脾脏和淋巴结中的非目的细胞有ABC,3种,而肿瘤中有ABCDE,就会将剩下DE,2种和目的细胞一起被吸附。
问小鼠中性粒细胞分选试剂盒 (阴选)(C0064)的分选纯度是多少?
答以下是WT小鼠骨髓细胞、脾脏细胞、外周血分选前后纯度:
小鼠骨髓细胞,分选前后CD11b+ Ly6G+中性粒细胞的纯度为:45.72%和95.18%。
小鼠脾脏细胞,分选前后CD11b+ Ly6G+中性粒细胞的纯度为:6.30%和91.84%。
小鼠外周血,分选前后CD11b+ Ly6G+中性粒细胞的纯度分别为:20.04%和93.82%。
常见问题解答问Cocktail 系列的使用方法?
答在室温下解冻,开盖前请低速离心一下,以便将黏附于管壁的液体甩至管底。然后在实验前以 1:100(v/v)稀释至溶液样品(细胞裂解液或组织提取液)。
问三种磷酸酶抑制剂cocktail的区别
答成分功能均不一样,具体信息可在官网进行查询。用哪个需要根据老师的实验需求确定。C0002的抑制范围会相对C0003广泛一点,如果只想买一支又不确定哪个合适的话,推荐C0002。如果想要更全面的抑制,推荐C0004。
问TargetMol蛋白酶抑制剂是否可以和其他公司的磷酸酶抑制剂一起使用?
答可以一起使用。
问使用 CCK8 进行实验后,发现读值低,不变色、没差异等,应该怎么办?
答CCK8 在孵育 1-4 小时后,OD 读值在 1-2 之间为佳,线性关系比较好。关于 CCK8 的使用问题,通常建议调整细胞状态、增加种板数量、改变加药浓度、延长孵育时间等。
问蛋白酶抑制剂 cocktail C0001 使用时加到蛋白液中的有效抑制时间有多久?
答这个我们暂时没有准确的数据,因为它对不同样品不同蛋白的保护程度是不一样的。一般单次提取以后,不加蛋白酶抑制剂 cocktail 的样品蛋白会在 24 h 后发生明显降解,加了蛋白酶抑制剂 cocktail 的样品蛋白可以维持 48 h 不降解。如果提取后置于 -20℃ 储存的话,一般加了蛋白酶抑制剂 cocktail 的样品蛋白可以至少储存一个月,冻融三次;但时间长了或者冻融次数多了的话,蛋白还是会发生降解的,不同蛋白降解时间不一样的。