常见的 KRAS 突变类型是G12C（35%）、G12V（18%）、G12D（13%）、G12A（6%）、Q61H（4%）和G13D（4%）。不同KRAS突变在癌种间分布差异显著，如G12D在胰腺癌（42%）和结肠癌（30%）中最常见，而G12C则在肺癌中最常见（40%）。这种突变类型的差异性也说明针对特定 KRAS 突变开发靶向治疗具有重要临床价值 。

2025年6月19日，北卡罗来纳大学Chad V. Pecot教授领导的研究团队于 Cancer Cell 报道了一种表皮生长因子受体（EGFR）导向的小干扰RNA（siRNA）偶联物——EFTX-G12V。该分子通过结合RNA干扰（RNAi）技术与肿瘤靶向配体，在多种癌症模型中展现出显著的抗肿瘤效应。

EFTX-G12V 的开发

KRAS G12V 虽是临床中第二常见的 KRAS 突变类型，但至今仍没有针对性的抑制剂进入临床应用。

此前，该团队已利用一段工程化的人工 KRAS mRNA 序列，设计出了可特异性靶向 KRAS G12C 、KRAS G12V 和 KRAS G13D 突变的未修饰 siRNA，在此基础上，他们进一步设计了三种完全修饰的 KRAS G12V 特异性 siRNA 分子。

通过对这三种分子进行筛选评估并进行优化，研究者确定了一种 2'-O-甲基修饰的版本（Hi2OMe）。该 siRNA 在多种 KRAS G12V 突变癌细胞系中有效抑制细胞增殖、肿瘤球形成和 KRAS 蛋白表达，并显著降低下游 MAPK 信号通路的活性，同时几乎完全保留KRAS WT 表达（<5%抑制），展现出高度特异性。

热力学和结构分析表明，该 siRNA 的突变选择性源于其与 KRAS G12V mRNA 的特异性结合，这种结合由反义链第5位的单核苷酸错配所介导。

▲KRAS siRNA引导链与mRNA模拟双链体的热稳定性与结构

随后，研究者结合癌细胞系百科（CCLE）数据分析的结果——即表皮生长因子受体（EGFR）在多种 KRAS 癌症类型中高表达，他们将 EGFR 结合肽（GE11C）与特异性靶向 KRAS G12V 的 siRNA 偶联起来，从而构建了 EGFR 导向的、高度特异性的 RNAi 分子——EFTX-G12V。

▲GE11C介导的siRNA递送及EGFR表达的表征

EFTX-G12V 的抗肿瘤活性

体外实验及小鼠实验的结果显示：

1）EFTX-G12V具有广谱抗肿瘤活性

• EFTX-G12V在四种EGFR表达中等的KRASG12V突变肿瘤模型（肺癌H727、H441，结直肠癌SKCO1，胰腺癌Capan-2）中表现出显著优于pan-KRAS siRNA的肿瘤抑制效果。

• H727模型中，EFTX-G12V比pan-KRAS有更强抑瘤作用（82% vs. 60%），且在H441模型中，pan-KRAS完全无效，而EFTX-G12V抑瘤率达73%。

▲研究示意图

2）EFTX-G12V给药频率灵活，效果稳定

在SKCO1模型中，每周一次给药的EFTX-G12V疗效可与每周两次pan-KRAS相媲美，而每周两次给药的EFTX-G12V疗效最强，多次给药后未观察到EGFR表达降低。

3）EFTX-G12V 分子机制优势

• EFTX-G12V比pan-KRAS更持续抑制MAPK通路（pERK）与EGFR信号（pEGFR）；

• EFTX-G12V还能明显抑制Hippo通路关键因子YAP的磷酸化（pYAP-S127），提示可能克服YAP介导的KRAS抑制耐药性；

• RTK再激活在pan-KRAS组中频繁出现，提示其疗效受限，而EFTX-G12V组保持较长时间的通路抑制。

▲GE11C结合的EFTX-G12V siRNA在肺和结肠异种移植模型中的疗效

此外，在免疫正常小鼠中进行的初步安全性研究结果显示，EFTX-G12V 不会影响行为、体重、器官质量、骨髓及肝肾功能，也未诱导炎症反应。miRNAscope 技术证实其在体内广泛分布，尤其富集于皮肤、肾脏、肝脏和膀胱壁。尽管在肾小管可见轻微细胞质嗜碱性变化和微弱空泡形成，但未见组织学损伤或毒性迹象。

小结

综上，该研究通过结合靶向配体与化学修饰 siRNA 的策略，成功开发出一种以 EGFR 为靶点的 RNAi 药物（EFTX-G12V）。该药物在多种癌症模型中实现了对 KRAS G12V 突变的高效且特异性沉默，并显著抑制了肿瘤生长，首次验证了针对 KRASG12V 突变的精准 RNAi 治疗的可行性，为 KRAS 突变型癌症的治疗开辟了新的方向与可能。

科研助力

抑制 KRAS 的主要策略包括通过以下方式靶向其表面：

1）阻断Ras与其效应分子之间的相互作用。

2）将Ras捕获在非活性构象中，阻止效应分子结合和信号传导。

3）共价抑制剂分子与新发现的switch-II口袋相互作用。

2019年，多种化合物进入临床试验，包括：安进的AMG 510 ，Mirati Therapeutics的MRTX849 ，强生的JNJ-74699157 (ARS-3248)。

近期进展中，开发了能够结合SI/II口袋的小分子，该口袋存在于KRAS的活性和非活性形式中。这些化合物抑制GTP结合的KRAS与SOS1变构位点及其效应分子（如CRAF和PI3Kα）之间的相互作用。值得注意的是，基因泰克和其他研究团队发现了靶向KRAS switch I和II区域之间浅口袋（SI/II口袋）的分子。

TargetMol提供KRAS靶向化合物库 ，包含16,000种分子，助力相关研究的开展，欢迎私信咨询

原文链接：

https://www.cell.com/cancer-cell/fulltext/S1535-6108(25)00225-9#author -highlights-abstract