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TPS Assay Kit (Microanalysis)
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还可以货号 CB0238M
别名 海藻糖-6-磷酸合成酶活性检测（微量法）
海藻糖是由两个葡萄糖分子以α,α-1-1 糖苷键连接而成的一种非还原双糖，广泛存在于细菌、酵母菌、霉菌、食用菌、低等植物、昆虫、无脊椎动物和高等植物等多种有机体中。海藻糖的非还原性决定了它对酸、碱、高温等的稳定性。另外，它本身具有很强的吸水性，使它在生物体内具有抗脱水作用，在逆境条件下可通过识别外界刺激、产生和传递信号、基因表达和代谢调节来保护植物免受不良环境的伤害。植物体内主要以葡萄糖为底物合成海藻糖，该反应首先在海藻糖-6-磷酸合成酶（trehalose-6-phosphate synthase，TPS）的作用下，催化尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）和 6-磷酸葡萄糖反应生成中间产物6-磷酸海藻糖，再在海藻糖-6-磷酸磷酸酶（trehalose 6-phosphate phosphatase，TPP）的作用下去磷酸化，生成海藻糖。因此，测定TPS活性对于研究植物逆境具有重要意义。
TPS Assay Kit (Microanalysis)
一键复制产品信息 还可以货号 CB0238M 别名 海藻糖-6-磷酸合成酶活性检测（微量法）
海藻糖是由两个葡萄糖分子以α,α-1-1 糖苷键连接而成的一种非还原双糖，广泛存在于细菌、酵母菌、霉菌、食用菌、低等植物、昆虫、无脊椎动物和高等植物等多种有机体中。海藻糖的非还原性决定了它对酸、碱、高温等的稳定性。另外，它本身具有很强的吸水性，使它在生物体内具有抗脱水作用，在逆境条件下可通过识别外界刺激、产生和传递信号、基因表达和代谢调节来保护植物免受不良环境的伤害。植物体内主要以葡萄糖为底物合成海藻糖，该反应首先在海藻糖-6-磷酸合成酶（trehalose-6-phosphate synthase，TPS）的作用下，催化尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）和 6-磷酸葡萄糖反应生成中间产物6-磷酸海藻糖，再在海藻糖-6-磷酸磷酸酶（trehalose 6-phosphate phosphatase，TPP）的作用下去磷酸化，生成海藻糖。因此，测定TPS活性对于研究植物逆境具有重要意义。
| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 100 T | ¥ 3,024 | 4-6日内发货 |
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产品介绍
生物活性
| 产品描述 | 海藻糖是由两个葡萄糖分子以α,α-1-1 糖苷键连接而成的一种非还原双糖，广泛存在于细菌、酵母菌、霉菌、食用菌、低等植物、昆虫、无脊椎动物和高等植物等多种有机体中。海藻糖的非还原性决定了它对酸、碱、高温等的稳定性。另外，它本身具有很强的吸水性，使它在生物体内具有抗脱水作用，在逆境条件下可通过识别外界刺激、产生和传递信号、基因表达和代谢调节来保护植物免受不良环境的伤害。植物体内主要以葡萄糖为底物合成海藻糖，该反应首先在海藻糖-6-磷酸合成酶（trehalose-6-phosphate synthase，TPS）的作用下，催化尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）和 6-磷酸葡萄糖反应生成中间产物6-磷酸海藻糖，再在海藻糖-6-磷酸磷酸酶（trehalose 6-phosphate phosphatase，TPP）的作用下去磷酸化，生成海藻糖。因此，测定TPS活性对于研究植物逆境具有重要意义。 |
| 别名 | 海藻糖-6-磷酸合成酶活性检测（微量法） |
检测原理
海藻糖-6-磷酸合成酶（trehalose-6-phosphate synthase，TPS）催化UDPG与G6P生成海藻糖-6-磷酸，同时产生UDP；UDP在丙酮酸激酶与乳酸脱氢酶作用下，氧化NADH为NAD+，NADH的下降速率与UDP含量成正比，通过340nm吸光度下降速率反映TPS活性。
产品规格
100T/96S规格的产品组成及保存条件：
| 编号 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| CB0238M-ES | 100mL×1瓶 | 4℃保存； |
| CB0238M-A | 粉剂×1瓶 | -20℃保存；临用前加入12mL CB0238M-E溶解，剩余试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融； |
| CB0238M-B | 粉剂×2瓶 | -20℃保存；临用前每瓶加入10mL CB0238M-E溶解；现配现用； |
| CB0238M-C | 粉剂×1瓶 | -20℃避光保存；临用前加入0.1mL CB0238M-E溶解，剩余试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融； |
| CB0238M-D | 100μL×1瓶 | 4℃避光保存；临用前低速离心，以防止试剂沾在管壁； |
| CB0238M-E | 50mL×1瓶 | 4℃保存； |
| 工作液配制：临用前，先配置好CB0238M-B和CB0238UV-C，然后在CB0238M-B瓶中加入10μLCB0238UV-C和10μL CB0238M-D，充分混匀，现配现用。 | ||
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
操作说明
一、自备用品：
酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
二、样品处理：
1.细菌或细胞的处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：CB0238M-ES体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL CB0238M-ES），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3S，间隔 10S，重复30 次）；8000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2.组织的处理：按照组织质量（g）：CB0238M-ES体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织，加入 1mL CB0238M-ES），冰浴中匀浆。8000g ，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
三、测定步骤：
1.分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2.工作液配制：详见试剂的组成和工作液的配制。
3.在EP管中依次加入下列试剂：
| 试剂名称 | 测定管（μL） |
|---|---|
| 样本 | 100 |
| CB0238M-A | 100 |
| 混匀，30℃反应20min，95℃水浴2min灭活，冷却至室温。10000g 4℃离心5min，取上层反应液待测。 | |
| 在微量石英比色皿/96孔板中加入如下试剂反应液 | |
| 反应液 | 20 |
| 工作液 | 180 |
| 混匀，测定340nm下5min后吸光值A1与10min后吸光值A2，ΔA=A1-A2。 | |
四、TPS酶活性计算公式：
1.按照蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟催化1nmol NADH定义为一个酶活力单位。
TPS活力 (U/mg prot) = ΔA×V反总÷(ε×d)×109÷(V样×Cpr)÷T×10 = 1286×ΔA÷Cpr
2.按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟催化1nmol NADH定义为一个酶活力单位。
TPS活力 (U/g 鲜重) = ΔA×V反总÷(ε×d)×109÷(W× V样÷V样总)÷T×10 = 1286×ΔA÷W
3.按细菌或细胞密度计算
每1万个细菌或细胞每分钟催化1nmol NADH定义为一个酶活力单位。
TPS活力 (U/104 cell) = ΔA×V反总÷(ε×d)×109÷(V样×细胞数量)÷T×10 =2.57×ΔA
注：V反总：反应体系总体积，0.2mL；ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103 L/mol/cm；d：96孔板光径，0.5cm；V样：加入样本体积，0.1 mL；V样总：加入CB0238M-ES体积，1 mL；T：反应时间，5 min；10，稀释倍数；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量；细胞数量，500万。
注意事项
1.蛋白定量测定，建议使用TargetMol生产的BCA Protein Quantification Kit (C0050)。
2.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
计算器
体内实验配液计算器
请在以下方框中输入您的动物实验信息后点击计算，可以得到母液配置方法和体内配方的制备方法：
比如您的给药剂量是10 mg/kg，每只动物体重20g，给药体积100 μL， 一共给药动物10只，您使用的配方为5%
DMSO + 30%PEG300 + 5%Tween 80 + 60%Saline/PBS/ddH2O ， 那么您的工作液浓度为2mg/mL。 以上为“体内实验配液计算器”的使用方法举例，并不是具体某个化合物的推荐配制方式，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
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