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PL Assay Kit (Microanalysis)
一键复制产品信息
还可以货号 CB0297M
别名 果胶裂解酶活性检测试剂盒（微量法）
果胶裂解酶（pectinate lyases, PL , EC.10）是果胶酶的重要组成部分，是一种能降解植物细胞壁，导致植物组织软化甚至死亡的解聚酶，来源比较广泛，主要来源于微生物，可用于果汁、果酒的澄清，提高水果出汁率，植物病毒的纯化，纸浆的漂白和纺织品的生物精炼，在减少环境污染和降低能源消耗方面具有潜在的应用价值。
PL Assay Kit (Microanalysis)
一键复制产品信息 还可以货号 CB0297M 别名 果胶裂解酶活性检测试剂盒（微量法）
果胶裂解酶（pectinate lyases, PL , EC.10）是果胶酶的重要组成部分，是一种能降解植物细胞壁，导致植物组织软化甚至死亡的解聚酶，来源比较广泛，主要来源于微生物，可用于果汁、果酒的澄清，提高水果出汁率，植物病毒的纯化，纸浆的漂白和纺织品的生物精炼，在减少环境污染和降低能源消耗方面具有潜在的应用价值。
| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 100 T | ¥ 1,706 | 10-12日内发货 |
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产品介绍
生物活性
| 产品描述 | 果胶裂解酶（pectinate lyases, PL , EC.10）是果胶酶的重要组成部分，是一种能降解植物细胞壁，导致植物组织软化甚至死亡的解聚酶，来源比较广泛，主要来源于微生物，可用于果汁、果酒的澄清，提高水果出汁率，植物病毒的纯化，纸浆的漂白和纺织品的生物精炼，在减少环境污染和降低能源消耗方面具有潜在的应用价值。 |
| 别名 | 果胶裂解酶活性检测试剂盒（微量法） |
检测原理
果胶裂解酶作用于果胶中的α-1,4糖苷键，生成在还原端C4和C5之间位置具有不饱和键的不饱和寡聚半乳糖醛酸，在235nm处有特征吸收峰，测定235nm下吸光度的上升来表示果胶裂解酶的活性。
产品规格
100T/48S规格的产品组成及保存条件：
| 编号 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| CB0297M-ES | 100mL×1瓶 | 4℃保存 |
| CB0297M-A | 6mL×1瓶 | 4℃保存 |
| CB0297M-B | 6mL×1瓶 | 4℃保存 |
| CB0297M-C | 6mL×1瓶 | 4℃保存 |
正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
操作说明
一、自备用品：
紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板（UV板）、天平、低温离心机、恒温水浴锅、可调式移液枪、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
二、酶液提取
1.组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL CB0297M-ES），进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2.细胞、细菌或真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL CB0297M-ES），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃离心10min，取上清置于冰上待测（细菌、真菌等难以数量计算的微生物也可以称取 0.1g 细菌/真菌沉淀来 进行前处理）。
3.细胞培养液等：直接检测。
三、测定步骤：
1.分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至235nm，蒸馏水调零。
2.操作表（在EP管中依次加入）
| 试剂名称 | 对照管 （µL） | 测定管 （µL） |
|---|---|---|
| CB0297M-A | 120 | |
| CB0297M-B | 120 | |
| 40℃温育3min | ||
| 酶液 | 20 | 20 |
| 混匀，40℃反应30min | ||
| CB0297M-C | 60 | 60 |
| 混匀于微量石英比色皿/96孔板（UV板）测定235nm处吸光值A，△A=A测定管-A对照管。 | ||
四、酶活性计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1.组织中PL活性
(1)按照蛋白浓度计算
酶活性定义：在40℃，pH5.5条件下，每毫克蛋白每分钟分解果胶产生1nmol不饱和半乳糖醛酸所需的酶量为一个酶活力单位。
PL活性 (U/mg prot) = △A÷(ε×d)×V反总×109÷(V样×Cpr)÷T = 64.1×△A÷Cpr
(2)按照样本质量计算
酶活性定义：在40℃，pH5.5条件下，每克组织每分钟分解果胶产生1nmol不饱和半乳糖醛酸所需的酶量为一个酶活力单位。
PL活性 (U/g 鲜重) = △A÷(ε×d)×V反总×109÷(V样×W÷V样总)÷T = 64.1×△A÷W
2.细胞、细菌或真菌PL活性
酶活性定义：在40℃，pH5.5条件下，每104个细胞每分钟分解果胶产生1nmol不饱和半乳糖醛酸所需的酶量为一个酶活力单位。
PL活性 (U/104 cell) = △A ÷(ε×d)×V反总×109÷(V样×细胞数量÷V样总)÷T = 64.1×△A÷N
3.培养液PL活性
酶活性定义：在40℃，pH5.5条件下，每毫升培养液每分钟分解果胶产生1nmol不饱和半乳糖醛酸所需的酶量为一个酶活力单位。
PL活性 (U/mL) = △A÷(ε×d)×V反总×109÷V样÷T = 64.1×△A
注：ε：不饱和半乳糖醛酸摩尔消光系数：5200L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应体系中样本体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W，样本质量，g；T：反应时间，30min；109：换算系数，1mol=109nmol；N：细胞数量，以万计。
b. 用96孔板测定的计算公式如下
1.组织中PL活性
(1)按照蛋白浓度计算
酶活性定义：在40℃，pH5.5条件下，每毫克蛋白每分钟分解果胶产生1nmol不饱和半乳糖醛酸所需的酶量为一个酶活力单位。
PL活性 (U/mg prot) = △A÷(ε×d)×V反总×109÷(V样×Cpr)÷T = 128.2×△A÷Cpr
(2)按照样本质量计算
酶活性定义：在40℃，pH5.5条件下，每克组织每分钟分解果胶产生1nmol不饱和半乳糖醛酸所需的酶量为一个酶活力单位。
PL活性 (U/g 鲜重) = △A÷(ε×d)×V反总×109÷(V样×W÷V样总)÷T = 128.2×△A÷W
2.细胞、细菌或真菌PL活性
酶活性定义：在40℃，pH5.5条件下，每104个细胞每分钟分解果胶产生1nmol不饱和半乳糖醛酸所需的酶量为一个酶活力单位。
PL活性 (U/104 cell) =△A÷(ε×d)×V反总×109÷(V样×细胞数量÷V样总)÷T = 128.2×△A÷N
3.培养液PL活性
酶活性定义：在40℃，pH5.5条件下，每毫升培养液每分钟分解果胶产生1nmol不饱和半乳糖醛酸所需的酶量为一个酶活力单位。
PL活性 (U/mL) = △A÷(ε×d)×V反总×109÷V样÷T = 128.2×△A
注：ε：不饱和半乳糖醛酸摩尔消光系数：5200L/mol/cm；d：比色皿光径，0.5cm；V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应体系中样本体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W，样本质量，g；T：反应时间，30min；109：换算系数，1mol=109nmol；N：细胞数量，以万计。
注意事项
1.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
计算器
体内实验配液计算器
请在以下方框中输入您的动物实验信息后点击计算，可以得到母液配置方法和体内配方的制备方法：
比如您的给药剂量是10 mg/kg，每只动物体重20g，给药体积100 μL， 一共给药动物10只，您使用的配方为5%
DMSO + 30%PEG300 + 5%Tween 80 + 60%Saline/PBS/ddH2O ， 那么您的工作液浓度为2mg/mL。 以上为“体内实验配液计算器”的使用方法举例，并不是具体某个化合物的推荐配制方式，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
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